[00138511]主要果树病毒ELISA和RT-PCR鉴定及脱毒技术研究

一、课题组对栖霞、蓬莱、海阳和福山等地10个乡镇的苹果、大樱桃和葡萄主栽区32个果园进行了调查，检测发现了ASSVd、ApMV、ACLSV、CLRV、PDV、PNRSV、GLRaV、GLFV等危害性大的果树病毒8种，其中苹果病毒侵染率55.6％；樱桃病毒侵染率45.5％；葡萄病毒侵染率71.4％。现保存果树病毒母株10种。　　二、构建和完善了适用于果树病毒检测的DAS-ELISA、PAS-ELISA和TAS-ELISA三种酶联免疫检测方法；优化了RT-PCR分子检测方法。形成了一套果树病毒高效检测技术体系。　　三、创立了苹果恒定高温热处理结合二次茎尖培养法脱毒技术，增殖系数达到4～5，生根率78％，移栽成活率86％；樱桃砧木变温热处理结合微茎尖培养法脱毒技术，增殖系数达到6～8，生根率74％～87％，田间移栽成活率88.7％以及甜樱桃盆栽苗弱光变温热处理结合嫩芽嫁接法脱毒技术。形成了一套苹果、樱桃和葡萄脱毒繁育技术体系。　　四、培育出了红将军、烟富6、M26、M9、红灯、黑珍珠、美早、砂蜜豆、梅鹿特、赤霞珠、康能无核等果树脱毒原种苗，经国家落叶果树脱毒中心检测均不带危害性较大的果树病毒，并建立了原种保存圃。