[00138756]miR-425促进肝癌复发转移的作用及其分子机制研究

肝细胞癌是我国最常见恶性肿瘤之一,手术系当前肝癌的首选治疗方法,但术后复发转移率居高不下,5年的复发转移率超过70%。复发转移已成为当前制约肝癌整体治疗水平提高的关键。miRNAs在肝癌复发转移调控中具重要作用。 我们研究发现,miR-425在肝癌组织中呈显著性高表达（中位上调倍数8.9）,且其表达水平与肝癌的结节数目、微血管侵犯、TNM分期及BCLC分期显著相关（p ＜ 0.05）。预后分析证实,miR-425高表达组患者的总生存时间和无瘤生存时间均显著劣于低表达组（平均生存时间：41.6月 vs 31.0月,p ＜ 0.001;平均无瘤生存时间：36.0月 vs 24.4月,p ＜ 0.001）。多因素回归分析证实,miR-425高表达、微血管侵犯、TNM分期及BCLC分期系肝癌预后的独立危险因素。 体外研究证实,miR-425在高侵袭转移能力的HCCLM3细胞中的表达显著高于低侵袭转移能力的SMMC-7721细胞。我们采用慢病毒分别沉默HCCLM3细胞和过表达SMMC-7721细胞中miR-425的表达,与对照组细胞HCCLM3vector细胞相比,HCCLM3anti-miR-425细胞的划痕愈合能力和侵袭转移能力显著下,而两者的集落形成能力及增值潜能并无显著差异;而SMMC-7721-miR-425细胞的划痕愈合能力和侵袭转移能力均显著高于SMMC-7721vector细胞,两者的集落形成和增值亦无显著性差异。我们通过生物信息学方法筛选miR-425细胞的潜在靶基因,western-blot发现miR-425可抑制PTEN、TIMP2和SCAI的蛋白表达,荧光素酶报告基因证实,PTEN和SCAI系miR-425的靶基因。拯救实验证实,恢复SCAI的表达可完全逆转miR-425的生物学功能,而PTEN仅能部分逆转miR-425的生物学功能。进一步研究证实,SCAI可体外调控PTEN的蛋白表达。研究发现,miR-425可通过靶向SCAI调控integrin β1-Src-Fak-RhoA/CDC42信号通路的活性,而PTEN可调控AKT信号通路活性。综上证实,miR-425可通过靶向SCAI调控integrin β1-Src-Fak-RhoA/CDC42、PTEN-AKT信号通路调控肝癌细胞的侵袭转移。体内研究亦证实miR-425可体内抑制肝癌细胞的侵袭转移能力。 综上所述,miR-425可通过靶向SCAI促进肝癌细胞的侵袭转移,本研究有助于阐明肝癌侵袭转移的具体分子机制,miR-425可作为HCC复发转移防治的有效靶点。