[00139032]清热醒脑灵片中有效成分的研究

1.任务来源 课题“清热醒脑灵片质量标准的研究”于2009年12月被正式批准为“2009年沧州市科学技术研究与发展指导计划课题”（课题编号：09ZD259）。后经咨询有关专家,认为原项目名称有不妥之处。经沧州市科技局同意,改为“清热醒脑灵片中有效成分的研究”。 2.研究起止年限：2009年12月～2012年11月 3.应用领域和技术原理 本研究成果适用于药品的质量研究和质量控制领域。本课题选择采用《中国药典》中普遍应用的高效液相色谱法（HPLC法）和薄层色谱法（TLC法）对清热醒脑灵片中的有效成分小檗碱、栀子苷、黄芩苷进行了定性鉴别,并采用HPLC法对栀子苷、黄芩苷进行了定量分析,为提高清热醒脑灵片的质量可控性提供科学依据,从而保证临床用药的安全、有效。 4.成果 本课题对清热醒脑灵片中的有效成分小檗碱、黄芩苷、栀子苷进行了定性和定量分析。其中,采用TLC法鉴别小檗碱,采用HPLC法对黄芩苷、栀子苷进行了鉴别和含量测定。 （1）鉴别 采用TLC法鉴别黄连：结果：在三批供试品色谱中,在与黄连对照药材色谱相应的位置上,显三个相同的黄绿色荧光斑点,且相邻斑点之间分离良好;在与小檗碱对照品色谱相应的位置上,显一个相同的黄绿色荧光斑点;在无黄连的阴性样品色谱图中,无斑点。结果表明其他原辅料无干扰。 采用HPLC法鉴别栀子苷：色谱条件：C18色谱柱（4.6mm×250mm,5μm）;柱温：20℃;检测波长238nm;流动相：乙腈—水（15:85）。结果：供试品溶液色谱图中有一峰的保留时间与对照品溶液色谱图中主峰的保留时间一致,且与其它相邻峰分离度好,而阴性对照溶液色谱图中无此峰。表明其他原辅料对栀子苷无干扰。 采用HPLC法鉴别黄芩苷：色谱条件：C18色谱柱（4.6mm×250mm,5μm）;柱温：20℃;检测波长280nm;流动相：甲醇—0.2%磷酸（58:42,用三乙胺调节pH为3.0）。结果：供试品溶液色谱图中有一峰的保留时间与对照品溶液色谱图中主峰的保留时间一致,且与其它相邻峰分离度好,而阴性对照溶液色谱图中无此峰。表明其他原辅料对黄芩苷无干扰。 （2）含量测定 采用HPLC法测定栀子苷、黄芩苷的含量。 栀子苷：色谱条件同栀子苷鉴别项下。经空白干扰试验结果表明,其他原辅料对栀子苷的含量测定无干扰;线性关系试验中,栀子苷溶液在6.36～95.4μg/ml浓度范围内与其峰面积呈良好的线性关系,回归方程为A=24.62C+19.77,r=0.99988（n=6）,表明线性关系良好;精密度试验RSD为0.42%;稳定性试验RSD为0.83%,表明供试品溶液在室温下8小时内稳定;重复性试验RSD为0.67%;回收率试验采用加样回收法,平均回收率为99.17%,RSD为2.28%（n=9）。上述结果表明,本方法专属性强、重复性好,在一定浓度范围内,呈良好的线性关系,可用于清热醒脑灵片中栀子苷的含量测定。 黄芩苷：色谱条件同黄芩苷鉴别项下。经空白干扰试验结果表明,其他原辅料对黄芩苷的含量测定无干扰;线性关系试验中,黄芩苷溶液在22.18～110.92μg/ml浓度范围内与其峰面积呈良好的线性关系,回归方程为A=46.46C-84.36,r=0.9999（n=5）,表明线性关系良好;精密度试验RSD为0.063%;稳定性试验RSD为0.54%,表明供试品溶液在室温下8小时内稳定;重复性试验RSD为0.46%;回收率试验采用加样回收法,平均回收率为101.72%,RSD为1.66%（n=9）。上述结果表明,该方法操作简便,专属性、重复性好,可用于清热醒脑灵片的质量控制。 5.推广应用的范围、条件和前景 本课题研究成果可向具有清热醒脑灵片批准文号的生产企业推广,或作为企业内控标准,以提高药品的质量可控性和市场竞争力;或向药品行政管理部门申请提高本品质量标准,批准后,可作为企业注册标准执行,不但可以保证药品质量,保障临床用药的安全有效,产生较好的社会效益,也可提高产品竞争力,获得良好的经济效益。 6.存在的问题和改进意见 中药成分复杂多样,而清热醒脑灵片中有十三味中药,故其中的成分繁多。所以,应进一步研究和探索清热醒脑灵片中的其他有效成分的定性及定量分析方法。