[00139750]靶定位于E-Cadherin启动子的小RNA激活技术治疗前列腺癌及其分子作用研究

小RNA诱导的基因激活现象在2006年一经报道便成为研究热点,主要因为其具有反传统意义（与传统转录后RNA干扰理论相比）的特征--发生在转录水平,引起相应的目的基因表观遗传学修饰改变,可以有效激活目的基因上调。然而目前对RNA激活的现象以及相关分子作用机制了解还十分有限,有关小RNA激活技术作为疾病治疗新策略的研究也很少,因此本课题组选择该领域作为我们的研究方向,并且选择了小RNA激活抑癌基因E-Cadherin对前列腺癌细胞增殖、侵袭转移抑制作用作为切入点开展我们的研究工作。 在本课题研究中,我们首先评估了小RNA激活技术治疗前列腺癌的效果,结果显示,使用小RNA激活技术上调目的基因E-Cadherin的表达,可以抑制前列腺肿瘤细胞的增值和转移能力,在此基础上,我们扩大肿瘤细胞株,使用小RNA激活技术在肝癌细胞株中成功上调了目的基因P21的表达,并且观察到了相应的肿瘤抑制现象,该研究结果为RNAa技术作为新型治疗策略提供了部分证据。其次,我们在目的抑癌基因E-Cadherin启动子区域发现了多个小RNA转录水平的调控靶点,其中包括1个RNA激活的靶位点,3个RNA转录抑制的靶位点,该结果表明,在基因启动子区域同时存在小RNA激活或抑制的转录调控靶点。目前,我们据此发现,已经申请了相关发明专利。 另外,在探讨小RNA激活的分子机制中,我们发现了在传统RNAi中起到核心作用的Ago-2蛋白同时也为小RNA激活所必须。 本项目对小RNA激活技术治疗前列腺癌进行了深入的研究,为RNAa技术作为治疗策略提供了依据,为RNAa技术进一步临床研究提供了理论基础,并发明了一种转录水平基因表达调控的方法和应用,申请了国家发明专利,为后续开发这项技术提供了可靠保证,有一定的推广价值,值得进一步深入研究并逐步应用于临床治疗。 小RNA介导基因转录水平诱导基因激活现象的发现,大大扩展了人们对基因表达调控的认识,非编码小RNA介导的转录水平基因激活技术作为新的研究领域,与传统转录后基因沉默等基因调控技术相比,有着更为广阔的应用前景,RNAa必将和RNAi技术一样,应用到更广阔的领域,RNAa有望成为一种新型的基因治疗手段,可作为前列腺癌以及其他恶性肿瘤基因治疗的一种有效手段。 本研究中对RNA激活现象进行了更多的描述,并在抑癌基因E-cadherin启动子区域发现了新的小RNA激活靶点,给RNA激活现象提供了新的有力证据。 目前已发表相关SCI文章4篇,申请国家发明专利一项。