[00139876]阿尔巴斯绒山羊种质资源保护与创新利用

该课题自2008年启动以来,在国家科技重大专项课题和“863”课题的支持下,本课题组与内蒙古亿维白绒山羊有限责任公司合作,共分离和保存了不同个体来源的纯种阿尔巴斯绒山羊胎儿成纤维细胞10株;成功建立了绒山羊脂肪间充质干细胞（Adipose-derived stem cells,ADSCs）、骨髓间充质干细胞（Bone marrow stromal cells,BMSCs）和骨骼肌卫星细胞（Muscle-derived satellite cells,MDSCs）等成体干细胞系;并通过体外分离得到了内蒙古阿尔巴斯型绒山羊初级、次级毛囊生长期各自毛乳头细胞并稳定传到20代;同时,还进行了内蒙古阿尔巴斯型绒山羊胚胎干细胞和iPS细胞的建系研究,取得了一些基础实验数据。在功能基因筛选和细胞及动物模型的建立方面,对不同生长阶段绒山羊绒质表型（净绒率、绒毛长度、绒毛细度、羊绒强力、伸度、产绒量）进行基因筛选工作,筛选与初级毛囊和次级毛囊发生相关的基因,揭示基因与毛囊发育的相关性。选出部分基因进行了细胞水平和动物水平的验证,构建了与绒山羊产绒量相关的基因毛囊特异高效表达载体7个,建立转基因细胞系12个,利用原核显微注射法制作了Tβ4、VEGF等6种转基因小鼠,通过P筛选得到转基因阳性小鼠。其中阳性Tβ4、VEGF转基因小鼠毛囊直径和数量明显增加,为今后大量建立小鼠绒毛发育动物模型奠定了良好的基础。已经建立并优化了绒山羊卵母细胞的体外成熟培养体系,成熟率稳定在70％左右,体细胞克隆和基因编辑细胞克隆囊胚的发育率现在稳定在20％左右。共移植受体羊2277只,已获得存活转基因克隆羔羊144只,另外获得F1代转基因绒山羊26只,共获得转基因克隆绒山羊170只。其中,转VEGF和Tβ4基因的绒山羊中出现了羊绒产量显著提高的个体,具有显著的育种价值。在已有的研究基础上规模化创制生产性能大幅度增加的转基因山羊群体,培育转基因山羊新品系,是下一步摆在课题组面前亟需解决的紧迫问题。在今后几年中,课题组将继续开展转基因山羊的饲养管理、繁殖和遗传育种等技术研究,制定规范化、标准化的转基因山羊新品种饲养管理技术体系,开展转基因山羊生物安全、育种价值评价和新品种（系）认定工作,推进绒山羊的种质资源创新利用和产业化进程。