[00014225]植物单花粉高通量收集与PCR检测方法
技术详细介绍
本发明公开一种植物单花粉高通量收集与PCR检测方法，包括步骤为：显微镜分离花粉以及花粉破囊壁和染色；分装碱性裂解液于PCR板中，密封并离心使裂解液沉于管底；显微镜下用特殊镊子挑选着色单花粉粒并放入PCR管裂解液中；分装矿物油于PCR板中，短暂离心；置于PCR仪上90-98℃温度下裂解；在各管中加入TE缓冲液中和，离心，加入PCR反应成分；短暂离心，置于PCR仪上，反应参数为：90-98℃保持3-8分钟，热循环依不同反应而定，循环数为35-40，最后72℃延伸5-10分钟，保持于4℃下；PCR产物用电泳分离并在成像系统上进行扫描拍照。本发明具有效率高等优点，特别适用于生殖遗传统计分析。
