[00140063]基于诱导应激的海洋源金属硫蛋白制备及纯化工艺研究

1、课题来源与背景 如何降低重金属对人体危害已成为目前仄待解决安全性问题之一。目前,解毒剂主要是依靠化学合成,生物利用度低,还伴有较大副反应,因此,如何找到一种天然高效的对重金属具有解毒作用的生物制剂就显得颇为重要。 2、技术原理及性能指标 本项目选用福建省大宗海水养殖贝类（牡蛎）作为原料,采用多因子联合诱导应激,提高贝类体内MT含量,并突破纯化及检测技术等若干产业化关键共性工程技术,提取纯化对重金属具有较强解毒作用的海洋源金属硫蛋白,该产品的研究对促进我省贝类资源的高值开发具有至关重要的作用,贝类MT将是未来MT产业发展的一个重要方向。 3、技术的创造性与先进性 本项目紧密结合我国海洋水产加工产业的迫切需求,充分发挥福建省的海洋水产类资源优势,选用福建省大宗海水养殖贝类（牡蛎、贻贝等）作为原料,采用多因子联合诱导应激,提高贝类体内MT含量,通过多级膜过滤系统与层析技术、液质联用等提取手段,突破原料高效预处理、目标产物高效提取、目标产物分离纯化、检测分析等关键共性工程技术瓶颈,减少提取纯化过程中有机溶剂的使用,制备对重金属具有较强吸附作用作用的海洋源金属硫蛋白,建立绿色提取工艺,开发具有高效海洋生物源重金属解毒制剂。本项目着力海洋水产贝类高值化开发应用重大关键共性技术的突破,对改变我省贝类出口以冷冻为主的格局,增加产品附加值,提高投资收益率,促进我省贝类资源的高值开发具有至关重要的作用,为今后贝类MT的产业发展提供思路和科学依据。 4、技术的成熟程度,适用范围和安全性 （1）采用兔肝提取金属硫蛋白,资源有限、生产量存在着严重的不足、很难形成市场规模。福建省贝类资源丰富,选用贝类资源作为MT提取源,不仅促进我省贝类资源的高值开发,而且将带动未来MT产业发展的新方向。 （2）兔肝MT提取工艺中使用大量乙醇和氯仿,不但使生产工艺繁琐,产品成本居高不下,而且污染环境。本项目降低传统工艺中因加入大量有机溶剂及无机盐产生试剂的浪费及后续的去除工艺而增加的产业成本,建立绿色环保的中试生产工艺路线。 5、应用情况及存在的问题 （1）多种元素（Zn2+、Cd2+、Cu2+、Cr6+、Se4+）混合培养下牡蛎MT的诱导效果可在短期内显现出来,但由于金属之间的相互作用,会影响各个金属在生物体内的吸收代谢途径,因此MT与时间、元素剂量不呈现良好线性关系,波动较大,不利于对MT诱导过程的实施和控制。但本实验仅采用均匀实验设计法进行了初步的探索,有关多元素诱导对MT的诱导机制、规律及诱导效果还需进行深入地研究。 （2）在基因水平上研究MT联合诱导合成规律和机制,这也是目前国内外对于MT研究的难点和热点。