[00140088]马铃薯X病毒侵染本氏烟中外泌体组分的鉴定及功能分析

本研究以马铃薯X 病毒（potato virus X, PVX）为研究对象,通过对PVX 侵染的本氏烟叶片中分离出的质外体的蛋白质组学分析表明,鉴定出97 种不同的蛋白质存在于病毒侵染和健康的质外体中,其中一些蛋白与寄主防御相关,除此之外,病毒蛋白也存在其中,而且通过肽段分析发现外壳蛋白是主要的病毒成分。进一步通过RT-PCR 和northern-blot 检测到病毒核酸,并且通过透射电子显微镜观察到病毒粒子。为了研究质外体中的病毒粒子能否再次感染植物,我们将新鲜提取的质外体溶液摩擦接种在健康本氏烟叶片上,会出现典型的PVX 侵染症状,说明从PVX 侵染的本氏烟叶片中提取得到的质外体具有侵染性,但当采用注射浸润接种本氏烟叶片时则不出现症状,说明质外体中的病毒粒子不能被植物重新吸收。细胞外囊泡,如外泌体等却可以双向运输,为了探究质外体中病毒粒子与细胞外囊泡的关系,我们通过高速离心将外泌体与质外体液分离,TEM 显示PVX 病毒粒子与外泌体独立存在于质外体中。这些结果表明,PVX 病毒粒子以单向方式释放到本氏烟质外体中,并且不共享外泌体的双向运输。该研究的主要结果发表在一区SCI 期刊Molecular Plant Pathology 上,培养毕业硕士研究生2 人。