[00140926]基于微透析结合光纤激光诱导荧光的异丙酚体内原位在线监测

本研究以静脉麻醉药异丙酚为研究对象,进行了在线前处理、衍生化反应、微顺序注射、光纤传感检测一系列的研究,为准确、快速测定异丙酚的血药浓度构建了异丙酚光纤传感检测分析平台,具有在线前处理、在线衍生化和检测的特点,也可用于其它药品食品检测和环境监测等研究。将光纤传感分析方法与毛细管微萃取系统、微顺序注射- 阀上实验室、近红外漫反射光谱等多种方法联用,进行生物样品、药物制剂、药材的定性、定量分析,极大地拓展了光纤传感分析的应用范围。 研究内容： 1、异丙酚的快速衍生化研究 为提高异丙酚检测的灵敏度,消除干扰,研究异丙酚快速衍生化方法。根据异丙酚（2,6-二异丙基苯酚）的化学结构,考察丹磺酰氯荧光衍生化法、重氮偶合衍生化法、Gibbs’’反应衍生化法的衍生效果,优化衍生反应条件。依据在线快速衍生化的要求,即反应简单快速,副反应少,不需加热和避光,反应产物稳定等要求,优选了重氮偶合衍生化法、Gibbs’’反应衍生化法用于异丙酚的在线快速衍生化。通过异丙酚的快速衍生化,发现衍生产物具有更强的紫外吸收,提高了检测灵敏度,且检测波长红移,可减少内源性物质对异丙酚测定的干扰。同时异丙酚在线快速衍生化方法的选择也为其他药物衍生化研究提供了研究基础。 2、建立重氮化偶合结合微顺序注射-光纤传感检测异丙酚的新方法。 建立了重氮偶合衍生化-微顺序注射-光纤传感分析异丙酚的方法,进行异丙酚的快速在线分析。将光纤传感技术与微顺序注射结合,以光纤为传导介质,将光纤光谱仪、微顺序注射分析仪的八通阀与氘灯光源连接,用计算机控制,利用该系统的流动注射与光纤传感的实时监测相连,自动化操作实现样品在线衍生化和检测,一次样品分析仅需80s,每小时可测定46份样品。将微顺序注射操作系统与光纤传感结合的分析技术也可用于食品药品检测、环境监测、原位测定、生化分析等领域。采用此方法快速检测异丙酚的血药浓度,绘制大鼠血浆异丙酚药-时曲线。 3、基于Gibbs’’试剂衍生化结合毛细管微萃取-光纤传感-微顺序注射在线分析异丙酚 首次建立了毛细管微萃取系统-衍生化-微顺序注射-光纤传感在线分析异丙酚的方法。该检测系统可依次进行在线前处理、衍生化反应、在线光纤传感检测的自动化微顺序注射分析,实现了异丙酚全血样品的自动化在线检测。该检测系统进一步小型化、一体化,可研发异丙酚快速分析仪,用于异丙酚生物样品的快速检测。 考察了毛细管微萃取系统的影响因素,如毛细管长度、毛细管直径、系统打出流速、管内停流时间、萃取后静置时间、萃取溶剂、蛋白沉淀剂等因素,优化了毛细管微萃取的条件,其与传统液-液萃取法比较操作简单、快速、萃取效率高,适用于异丙酚全血样品的在线前处理。对微顺序注射分析条件进行考察,确定了光纤传感-微顺序注射分析的实验参数。将所建立的方法用于全血中、大鼠血浆中异丙酚快速检测。通过微顺序注射阀上实验室系统的检测设定相应的程序,由计算机自动化控制,实现了由异丙酚全血样品经毛细管萃取分离后,通过异丙酚衍生化反应后微顺序注射-光纤传感在线检测的自动化完成。确定了毛细管微萃取。与HPLC法比较,检测结果经过配对t检验（检验水准：α=0.05）,得出两种方法测得的血浆及全血中异丙酚浓度没有显著性差异（P＞0.05）。 4、异丙酚微透析取样影响因素研究 建立了异丙酚微透析采样方法。通过体外探针回收率实验考察了异丙酚微透析采样增量法和减量法回收率的差异性和相关性,考察了不同的灌注速度、不同的灌注液（林格氏液和含羟丙基-β-环糊精的灌注液）、不同的透析媒介（异丙酚乳剂和异丙酚对照品）对探针回收率的影响,发现这三种因素均为微透析取样影响因素。对影响因素进行优化,通过在灌注液中加入羟丙基-β-环糊精,降低灌注速度可提高微透析探针的回收率,改善微透析的效果。但在活体动物的微透析在体实验中,动物的血液中很难加入羟丙基-β-环糊精等增溶剂,异丙酚微透析原位取样仍需进一步深入研究。本项目将微透析用于脂溶性药物分析进行了初步探索,系统考察其影响因素,为异丙酚的在体研究奠定基础,同时为脂溶性药物的微透析采样研究提供了科学理论指导。 5、进行异丙酚群体药物代谢动力学研究。 进行了新疆地区肿瘤患者异丙酚群体药物代谢动力学研究。采集95例新疆地区肿瘤患者用异丙酚进行麻醉手术的血液样品后,以高效液相色谱法检测,采用Monolix软件建立了新疆地区肿瘤患者异丙酚群体药物代谢动力学模型。分析体重、年龄、种族等因素对相应药物代谢动力学参数的影响,并采用直观预测检验法对最终模型进行内部验证,所估算的群体药代动力学参数可以较好地反映新疆地区肿瘤患者异丙酚药物代谢的群体特征。该研究为肿瘤患者异丙酚麻醉用药提供指导。 本研究发表科研论文14篇,培养研究生3名。