[00141442]抗斑点叉尾鮰病毒单克隆抗体的制备及其胶体金试纸条的研制

斑点叉尾鮰病毒病（CCVD）是由斑点叉尾鮰病毒（Channel catfish virus）引起的疾病,导致斑点叉尾鮰出现很高的死亡率。目前检测该病原报道了很多分子生物学检测方法,而免疫学检测方法未见报道。本项目以全病毒作为免疫原,成功研制了抗斑点叉尾鮰病毒的单克隆抗体和多克隆抗体。单克隆抗体主要为8B6,17H2和27E4。通过间接ELISA检测,所有抗斑点叉尾鮰病毒单克隆抗体具有较强的特异性,仅与斑点叉尾鮰病毒反应。抗原决定簇位点分析显示,抗体27E4针对170kDa和47kDa蛋白带;17H2针对47kDa蛋白带,而8B6针对的56kD。多克隆抗体通过间接ELISA方法检测效价1：100,000- 1：1,000,000。应用制备单克隆抗体和多克隆抗体,建立夹心ELISA方法后,进一步研制出了免疫胶体金试剂条。该试剂条具有较强的特异性,具有较好的稳定性,最低检测线是104TCID50/mL,且,能够15min内出结果。在人工感染实验中,感染病鱼组织采用免疫胶体金试剂条和“金标”方法进行检测。结果显示,研制的免疫胶体金试剂条与“金标”方法结果一致,能够识别斑点叉尾鮰病毒,可作为一种快速、方便的现场诊断工具,用于控制疾病的爆发和控制 CCVD的传播。 本项目发表SCI文章4篇;授权国际发明专利1项,国内发明专利1项;研制的试纸条在国内3家检测单位进行应用,并得到认可,具有良好的应用前景。