[00143140]用恢复基因的近等基因系研究细胞质雄性不育性的机理

小麦恢复基因的近等基因系为基础材料，繁殖了含恢复基因的恢复系和杂交种及不含恢复基因的不育系和保持系，提取了四种材料的线粒体，mtDNA 和mtRNA。（1）利用cDNA-RAPD 方法对4 种材料mtRNA 进行差异展示分析，找到了在不育系中特异表达的差异片段S238999，Northern 杂交证实S238999 与V-CMS 具有一定的相关性。（2）根据小麦coxⅢ基因的序列设计引物并对四种材料的线粒体cDNA 和mtDNA 进行特异性扩增，比较各类材料多个样本的序列差异，发现coxⅢ基因有5种不同类型的转录本，转录本有14 个编辑位点，其中12 个引起了氨基酸种类的变化。通过对mtRNA编辑频率的比较发现：在恢复系中的编辑频率比在具有相同胞质的保持系中要高；引入恢复基因后，不育胞质中coxⅢ基因转录本的编辑频率明显提高，这说明不同核背景对coxⅢ基因转录本的RNA 编辑有一定影响，推测coxⅢ基因RNA 编辑与细胞质雄性不育具有一定相关性。（3）利用SRAP等分子标记筛选了四种材料之间mtDNA 的差异，对差异片断进行了克隆测序，未发现与雄性不育相关的序列。