[00143486]白细胞介素17在感染性角膜炎发病机制及临床治疗中作用的研究

“白细胞介素17在感染性角膜炎发病机制及临床治疗中作用的研究”成果属于医疗卫生技术领域,主要应用于感染性角膜炎的治疗。 该成果通过探索IL-17在感染性角膜炎免疫阶段的作用及机制,发现在BALB/c小鼠中适量的IL-17可以通过调节MerTK阳性巨噬细胞的分化及MerTK阳性细胞数、巨噬细胞数及MerTK阳性巨噬细胞比例来促进免疫细胞的凋亡和清除,从而减轻炎症反应。在真菌性角膜炎中,VIP调控IL-17的表达,参与真菌性角膜炎的免疫应答。明确了IL-17在感染性角膜炎中的治疗作用,主要研究内容如下： （1）IL-17在C57BL/6和BALB/c小鼠铜绿假单胞菌角膜炎中的表达以及细胞来源。 8周龄雌性C57BL/6小鼠、BALB/c小鼠,购自Jackson Laboratory（Bar Harbor,ME,USA）。全身情况良好,眼部发育正常,实验动物使用符合美国眼科和视觉研究协会（The Association for Research in Vision and Ophthalmology,ARVO）关于在眼科和视觉研究中动物使用的原则和标准。 ①IL-17在C57BL/6和BALB/c小鼠正常角膜和细菌感染后角膜中的表达 C57BL/6小鼠发生铜绿假单胞菌性角膜炎后角膜中IL-17的表达高于BALB/c小鼠角膜。 ②IL-17的主要细胞来源 中性粒细胞和巨噬细胞均是铜绿假单胞菌性角膜炎中IL-17的主要细胞来源。 （2）BALB/c、C57BL/6小鼠铜绿假单胞菌性角膜炎中IL-17的功能 8周龄雌性C57BL/6、BALB/c小鼠,购自Jackson Laboratory（Bar Harbor,ME,USA）。小鼠眼部发育正常,排除眼部疾病。实验动物使用符合ARVO关于在眼科和视觉研究中动物使用的原则和标准。 数据采用x±s表示,两组比较采用T-test,以p＜0.05为差异有统计学意义。 ①IL-17对BALB/c小鼠铜绿假单胞菌性角膜炎的影响 IL-17处理感染铜绿假单胞菌性角膜炎的BALB/c小鼠,未能改变病变程度。 ②IL-17中和抗体对BALB/c小鼠铜绿假单胞菌性角膜炎的影响 IL-17中和抗体处理后,BALB/c小鼠角膜炎加重,5天炎症因子升高及中性粒浸润加重。 ③IL-17中和抗体对C57BL/6小鼠铜绿假单胞菌性角膜炎的影响 IL-17中和抗体均未显著改变C57BL/6小鼠细菌性角膜炎的临床评分、对炎性因子及中性粒数目均无明显影响。 （3）IL-17在铜绿假单胞菌性角膜炎中对MerTK阳性细胞、巨噬细胞和MerTK阳性巨噬细胞的调控作用 8 周龄雌性C57BL/6小鼠、BALB/c小鼠,购自Jackson Laboratory（Bar Harbor,ME,USA）。全身情况良好,眼部发育正常,实验动物使用符合美国眼科和视觉研究协会（The Association for Research in Vision and Ophthalmology,ARVO）关于在眼科和视觉研究中动物使用的原则和标准。 Real-time RT-PCR、ELISA、细胞分类计数的两组比较采用T-test,以p＜0.05为差异有统计学意义。 ①IL-17中和抗体处理感染烟曲霉菌性角膜炎C57BL/6小鼠后,F4/80阳性细胞数和MerTK阳性细胞的变化 IL-17中和抗体可降低BALB/c小鼠MerTK阳性细胞数、巨噬细胞数及MerTK阳性巨噬细胞比例。 ②IL-17中和抗体处理感染烟曲霉菌性角膜炎BALB/C小鼠后,F4/80阳性细胞数和MerTK阳性细胞的变化 IL-17中和抗体升高C57BL/6小鼠MerTK阳性巨噬细胞数,但并未显著改变疾病病程。 （4）在真菌性角膜炎中,VIP对IL-17的调控作用 采用8周龄小鼠角膜感染母鼠BALB/c和C57BL/6进行体内实验。小鼠的治疗符合视觉研究协会和眼科声明中关于在眼科和视力研究中使用动物的规定。 采用t检验计算PCR数据的统计学差异。P＜0.05为差异有统计学意义。所有实验重复一次。数据显示为平均标准差（SD）。 ①VIP拮抗剂处理感染真菌性角膜炎的BALB/C小鼠后IL-17表达的影响 VIP拮抗剂可在BALB/C小鼠中使IL-17升高,炎症反应加重。 ②VIP处理感染真菌性角膜炎C56BL/6小鼠后IL-17表达的影响 VIP可在C57BL/6小鼠中升高IL-17,减轻炎症反应。