[00143624]四价HPV预防性病毒样颗粒疫苗临床前预研究

本项目将立足于酵母表达系统,通过针对外源基因表达调控、高密度发酵、病毒样颗粒体外装配及高效纯化等关键技术环节的系统性优化研究,实现多型别HPV病毒样颗粒的高效、低成本制备;于疫苗成分中,在HPV16、18型基础上,加入我国人群较为流行的HPV52、58型抗原,通过不同型病毒样颗粒的合理组合形成四价疫苗,从而扩展疫苗保护面。研究还将开展临床前研究所需的其它工作并进行疫苗效果及安全性的初步评价。 （1）项目期内成功构建、制备4个HPV型的病毒样颗粒。建立高效低成本的病毒样颗粒制备的系统的基因工程上下游技术体系。 （2）经病毒颗粒免疫小鼠,获得具有高免疫原性的,能诱导强中和保护作用,具有宽保护面的HPV疫苗。抗体水平达到1：1024,4个HPV型均能提供有效中和抗体,在体外可阻止假病毒颗粒对293FT细胞的侵染,血清中和滴度达到1：2000以上。 （3）首先在2L Applicon发酵罐中建立先进的疫苗生产工艺及质控标准,确定了大规模生产的发酵条件,发酵液菌体生物量高达417g/L,并成功在20L发酵罐水平上实现了工艺放大; （4）纯化的重组蛋白达到34.5mg/L,纯度达到95%,成功实现了病毒样颗粒的高效装配。 （5）对疫苗免疫的有效性进行了评价,对4个HPV型均能提供有效中和。在体外可阻止假病毒颗粒对293FT细胞的侵染,血清中和滴度1：2000以上。 （6）完成了多价疫苗的合理组合尝试,初步确定了4价疫苗的组合配方。 （7）完成实验室疫苗急毒安全性初步评价,已达到疫苗无明显副作用。 （8）申请专利2项,发表SCI论文2篇,核心期刊1篇;培养硕士研究生4名;解决1名硕士研究生及2名本科生到本单位工作。