[00143657]多巴胺神经元丧失后大脑皮质功能重组及其机制

本课题利用多巴胺神经元丧失动物模型,在不同时期通过活体功能影像学（PET/CT和MRS）检查与死后组织的细胞、分子生物学检测相结合的方法,探讨了多巴胺神经元丧失后大脑额、顶叶皮质功能变化的病理生理过程,以期为进一步探索该类疾病的发病机制和寻找其新的治疗和康复方法提供理论依据。 具体研究内容如下： 1)利用MPTP选择性地毁损猫双侧黑质内多巴胺神经元建立多巴胺神经元丧失模型,应用18F-FDG PET/CT技术对其额、顶叶皮质内脑组织糖代谢变化规律进行研究,探讨该区域功能的动态变化情况,为深入的机制研究提供了可靠的实验依据。 2)在PET/CT研究基础上,利用6-OHDA制作单侧PD大鼠模型,通过小动物专用的高场强1H-磁共振波谱仪在活体状态下观察大鼠额、顶叶皮质感兴趣区内组织代谢及生化改变,探讨了其在多巴胺神经元丧失后皮质功能改变机制中的作用。 3)利用免疫组织化学方法观察多巴胺神经元丧失后大鼠模型额、顶叶皮质内突触素（SYN）与神经丝蛋白（NF60, NF200）的表达情况,同时利用电镜观察上述区域内突触的结构变化,探讨了多巴胺神经元丧失后额、顶叶皮质功能和代谢变化的物质基础。 4)利用神经生化方法检测多巴胺神经元丧失后大鼠模型额、顶叶皮质内谷氨酸含量的变化,同时利用RT-PCR方法检测上述区域内GAP-43mRNA表达的变化并进行半定量分析,探讨了谷氨酸含量和GAP-43表达的改变在额、顶叶皮质功能和代谢变化中的作用。 5)利用激光扫描共聚焦显微镜检测各组大鼠额叶皮质感兴趣区细胞内Ca2+浓度变化并进行图像采集及荧光强度定量分析,同时利用RT-PCR技术检测上述区域内钙结合蛋白D28K mRNA表达的变化并进行半定量分析,探讨了该区域内Glu产生的兴奋性神经毒作用的途径。