[00143943]致龋菌中耐酸相关基因ffh的检测及克隆

该研究的主要目的是检测干酪乳杆菌、远缘链球菌、血链球菌中是否存在耐酸相关基因ffh，变形链球菌耐氟菌株中耐酸相关基因ffh是否发生突变。研究的主要技术原理是根据耐酸相关基因ffh的同源性和GenBank发表的各种属ffh基因序列，采用引物设计原则，从最保守区设计一对PCR引物，进行PCR，并进行克隆测序。该研究的创新之处在于：干酪乳杆菌、远缘链球菌、血链球菌中是否存在耐酸相关基因ffh和变形链球菌耐氟菌株中耐酸相关基因ffh是否发生突变目前尚无报道，该课题成功地证明了干酪乳杆菌、远缘链球菌、血链球菌中存在耐酸相关基因ffh，并对干酪乳杆菌的ffh基因进行了部分测序，该序列已在美国GenBank上登陆，登陆序列号为AY389024；成功检测到变形链球菌耐氟菌株中耐酸相关基因ffh发生突变，突变序列已登陆美国GenBank，序列号为AY857409。核酸疫苗作为第三代新型疫苗，就像重组亚单位疫苗一样，都是利用单一蛋白质抗原分子来诱导免疫反应，首先就要明确编码具有免疫活性的特定的抗原的DNA。因此，获得合适的抗原编码基因并将它插入到载体DNA上，是发展基因疫苗的一个重要环节。耐酸相关基因ffh的研究目前已经成为国内外学者的关注热点，该课题在不同致龋菌中检测到了耐酸相关基因ffh，并且耐酸性增强的变形链球菌耐氟菌株耐酸相关基因ffh发生突变，为以后制备核酸疫苗打下基础，也为进一步阐明变形链球菌耐氟菌株耐酸相关基因突变与变形链球菌耐氟菌株耐酸性增强的关系和研究氟化物防龋打下基础；同时证实了耐酸相关基因ffh与龋病发生关系极为密切，该研究方向提出了一种新的对龋病预防的概念，对构建防龋疫苗的合适抗原而进行主动免疫将具有重要意义，但尚需进一步研究耐酸相关基因ffh的功能及蛋白质的结构和功能表达。