[00143993]灵芝多糖通过PTEN/PI3K-AKT细胞信号通路抗肝癌移植瘤的机制研究

一、课题来源与背景 肝癌是临床上最常见的恶性肿瘤,具有高发病率、高复发率、高死亡率和低治愈率这个“三高一低”的特点。目前,肝癌的治疗以外科手术切除、肝移植、局部消融、介入化疗等技术为主,但总体治疗效果仍不理想 二、项目研究目的与意义 靶向治疗是当前的研究热点,该治疗以肿瘤相关的特异分子作为靶点,将抑制靶分子的药物或制剂用于肝癌的治疗。本课题组前期体外研究发现灵芝多糖显著抑制HepG2细胞增殖和凋亡。假如灵芝多糖体内也可以抗裸鼠肝癌,并且作用靶点明确,可为抑制肝癌新药灵芝多糖的开发提供临床前实验基础,为肝癌患者带来福音。本课题拟进行体内药效学研究,取瘤组织称重计算抑瘤率、HE染色检查瘤组织病理、流式细胞术检测细胞凋亡情况等考察灵芝多糖对裸鼠肝癌的影响,并进一步进行在体的机制研究：采用RT-PCR、Western blot和免疫组化法分别从RNA及蛋白水平考察灵芝多糖是否通过细胞信号通路PTEN-PI3K/AKT抗肝癌,并掌握灵芝多糖对抑癌基因的作用。 三、主要论点与论据 研究结果表明灵芝多糖治疗组的HepG2细胞迁移能力较阴性对照组明显减弱,差异具有统计学意义 （P ＜0.05）,灵芝多糖组12 h、24 h的侵袭抑制率分别为：31.7%、 64.0%,具有统计学意义（P ＜0.05）,并具有时间依赖性; 灵芝多糖治疗组与阴性对照组相比,VEGF蛋白含量显著下降,具有时间依赖性;灵芝多糖可体内抑制肝癌皮下移植瘤,1 wk、2 wk给药组的抑瘤率分别为18.98%、37.33%,与阴性对照组比较差异均具有统计学意义 （P＜0.05）,并具有时间依赖性;PI3K /Akt和Ras信号传导通路蛋白含量下降。 因此, 灵芝多糖体外对HepG2 细胞的迁移有抑制作用,其迁移抑制通过下调VEGF蛋白含量而实现。体内对HepG2 细胞的增殖也有抑制作用,可以通过下调PI3K /Akt和Ras信号传导通路蛋白含量而实现。 四、创见与创新： （1）制备裸鼠肝癌移植瘤的动物模型; （2）灵芝多糖是否通过PTEN-PI3K /AKT 信号通路调控肝癌裸鼠移植瘤,找出灵芝多糖作用于肝癌HepG2细胞的靶点 五、|社会经济效益,存在的问题： （一）、社会经济效益 肝癌是临床上最常见的恶性肿瘤,具有高发病率、高复发率、高死亡率和低治愈率这个“三高一低”的特点。靶向治疗是当前的研究热点,本课题研究表明灵芝多糖研究体外实验研究显示灵芝多糖可以显著减少迁移的HepG2细胞数,体内可以抗裸鼠肝癌,体内实验抑制荷瘤 HepG2细胞转移与PI3K /Akt细胞信号、抑制原癌基因c-myc表达Myc蛋白有关,并且作用靶点明确,可为抑制肝癌新药灵芝多糖的开发提供临床前实验基础,为肝癌患者带来福音。 （二）、存在的问题 和原研究方案相比,本项目多做了一些体外实验如：灵芝多糖对HepG2细胞的迁移抑制实验及相应蛋白的检测,而在体机制研究上只用免疫组织化学方法,尚未应用免疫印迹。 六、历年获奖情况 无 七、成果简介 本课题研究表明灵芝多糖研究体外实验研究显示灵芝多糖可以显著减少迁移的HepG2细胞数,体内可以抗裸鼠肝癌,体内实验抑制荷瘤HepG2细胞转移与PI3K /Akt细胞信号、抑制原癌基因c-myc表达Myc蛋白有关,并且作用靶点明确,可为抑制肝癌新药灵芝多糖的开发提供临床前实验基础,为肝癌患者带来福音。 本研究成果论文《灵芝多糖对人肝癌细胞HepG2增殖及体外迁移的影响》的引证文献情况如下： （1）中国学术期刊网络出版总库共4条 （2）中国优秀硕士学位论文全文数据库共1条。