[00144278]基于AMPK/Sirt1通路介导的自噬探讨小檗碱对移植肾缺血再灌注损伤的保护作用及机制

肾脏缺血再灌注 （I/R） 可造成肾移植患者术后早期移植物功能延期恢复甚至无功能,增加早期死亡的风险。小檗碱（berberine,BBR）是一种异喹啉生物碱,具有抗炎、降血脂、治疗糖尿病等药理作用,最新研究发现,BBR可减轻肾I/R损伤,但是具体机制尚未完全阐明。 动物实验建立大鼠异体肾移植模型,I/R造模前1周给予小檗碱灌胃处理（100mg/kg/天,连续1周）,体外实验建立大鼠肾小管上皮细胞缺氧/复氧（H/R）损伤模型,于H/R造模前给予小檗碱预处理6h。分别采用HE染色、Masson染色、生化检测、Western Blot等方法检测大鼠肾脏损伤程度;采用MTT实验及ELISA法检测缺氧/复氧对肾小管上皮细胞损伤程度及氧化应激水平;采用Western Blot、流式细胞术等方法检测移植肾I/R和肾小管上皮细胞H/R损伤过程中细胞凋亡情况;采用Western Blot及免疫共沉淀法检测Sirt1/FoxO3α信号通路蛋白在胞浆及细胞核的分布以及FoxO3α乙酰化的改变。结果发现,小檗碱预处理可明显降低大鼠异体肾移植后血清肌酐及尿素氮水平,肾脏组织病理学损伤减轻,氧化应激水平也相对降低。进一步通过给予相应信号通路干预剂证实,小檗碱改善移植肾缺血再灌注损伤的机制与促进肾小管上皮细胞Sirt1表达、促进FoxO3α入核后去乙酰化有关。本课题证实,小檗碱预处理通过调控Sirt1/FoxO3α信号通路抑制肾小管上皮细胞凋亡,从而减轻移植肾缺血再灌注损伤。