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本研究以小麦蓝粒单体附加系为材料,构建了相关cDNA文库和抑制差减文库,并分离鉴定了一些与小麦蓝色胚乳表达相关的特异性cDNA序列,其目的是为阐明小麦蓝色胚乳性状表达的遗传机制和发现相关基因提供研究基础。 研究获得以下主要结果: 1.利用蓝粒小麦未成熟种子mRNA构建了蓝粒胚乳相关cDNA文库,最终获得的未扩增文库约含1200000个克隆子,并对部分文库进行了扩增。 2.构建了小麦蓝色胚乳表达相关基因的抑制差减文库,文库约含10000个克隆子,插入片段多集中在100-500bp之间,平均长度约300bp。 3.筛选获得了16个阳性克隆子,其中7个cDNA序列在GenBank上没有找到较为匹配的序列,可能与小麦蓝色胚乳性状的表达有关,并涉及新的功能基因。 4.对4个候选cDNA序列的表达特异性分析发现:与玉米P450单氧化酶基因相关的cDNA序列3及功能未知的cDNA序列15在蓝白粒未成熟种子间差异表达,在蓝粒未成熟种子中的表达明显增强,说明它们可能与蓝粒性状的表达相关;功能未知的cDNA序列14、16在蓝粒未成熟种子中特异性表达,可能代表了与蓝色胚乳高度相关的基因。