[00145380]一种检测牛小细病毒的荧光定量PCR试剂盒及应用

细胞是生命活动的基本单元,其在生命科学基础研究和应用研究中的地位不容置疑。近年来实验细胞在基因工程产品表达、测试中的作用也日趋重要,尤其是许多原代细胞或传代细胞系（株）作为病毒的敏感宿主,能支撑病毒完成从吸附到基因组复制、转录、蛋白质合成、装配、裂解的整个生命过程。因此,实验细胞被广泛用于病毒毒株的分离、增殖、毒力测定、疫苗制备等领域。故病毒的细胞培养已发展成为现今最重要的病毒研究及生产的方法之一。 牛血清是细胞培养的重要辅料,在促进细胞贴壁、生长、分化中发挥重要的作用。在病毒疫苗生产中,病毒宿主细胞的品质决定疫苗生产的产量、质量,而宿主细胞的品质则由培养细胞的培养基、牛血清的质量支撑。所以国外血清生产厂采用先进的技术检测血清中病毒的污染。 迄今国外牛血清生产的知名公司,如Sigma、GIBCO、Hyclone均采用免疫荧光抗体技术检测牛血清中病毒的污染,即检出的是病毒的抗原。而本发明在建立免疫荧光抗体技术的基础上,同时建立检出牛血清中病毒核酸的荧光定量PCR技术,该技术利用分子生物学的原理及技术特点,直接定量检测早期污染,且极微量的病毒核酸,其灵敏度可达100 Copy/μl, 即每份牛血清样品中只要有100个病毒污染即可检出,这是免疫荧光抗体技术所不及的,牛源病毒荧光定量PCR技术的建立及试剂盒的研制成功,将有效保证牛源血清产品的质量,使国产基因工程产品和病毒疫苗尽早进入国际市场。 研究建立牛源源性病毒检测相关技术并开展牛源生物技术产品的检测,不仅可以直接产生经济效益,更重要的是保证了人用牛源性生物技术药物的安全性,保证人类健康,具有重要的社会效益和公共卫生意义。 在研发过程中于2008年底获得国家科技支撑计划项目的资金支持（项目编号：2008BAI54B06-42） ;课题名称：动物源性生物材料病毒检测技术研究。