[00145747]克隆技术在梅山猪保种中的应用

1、课题来源与背景 梅山猪是太湖猪中的一个突出的类群,以太湖排水干道--浏河两岸为繁殖中心,原产地主要分布在上海嘉定以及江苏省的太仓、昆山等地。梅山猪以繁殖力高而著称于世界,是迄今国际上公认的产子数最多的品系。以梅山猪为代表的太湖猪堪称我国猪育种材料中的瑰宝。梅山猪繁殖力高,产仔多,平均每胎产崽16头,最高记录33头。 由于梅山猪所处地理位置位于中国经济最为发达的长三角地区,该地区交通运输十分便捷、地方城市化、工业化的迅速扩展,使地方猪种的生存空间越来越小,加上外来品种的大规模引进和一味追求经济效益,纯种梅山猪饲养数量急剧下降,原有的优良特性在逐渐退化。如今纯种梅山猪仅饲养于为数不多的保种场内（上海地区主要保存于上海市嘉定区梅山猪育种中心）,一旦发生大规模疫情和自然灾害,将给该品种的有效保存带来灭顶之灾。如何保护该优良的地方猪种资源已成为摆在畜牧兽医工作者面前的一项迫切的任务,这不仅是发展我国当前经济、造福未来的需要,而且其成功的经验对于世界猪种遗传资源的保存具有重要的指导意义。梅山猪种质资源的保存对我国猪种种质资源的可持续性利用意义重大,这是一项利在当代,功在千秋的公益事业。 2、研究的目的与意义 本课题拟在上述成果的基础上,将体细胞克隆技术与动物种质资源保存有效结合,保存该保种猪场内全部梅山猪的遗传资源。由于经费有限,本课题仅优良的梅山猪公猪进行克隆,暂不将梅山猪母猪的克隆列入本研究的范围。该技术的成功应用可逐步在上海地区、长三角地区乃至全国范围内进行推广和普及,为猪种质资源的长期保存做出重要贡献。 3、主要论点和论据 选择生产与繁殖性能最为优秀的梅山猪公猪为供体细胞来源,通过已建立的体细胞克隆技术,获得体细胞克隆梅山猪,为以克隆技术为前提的猪体细胞保存在猪种质资源保存中的应用打下基础。 主要内容： 1、采集梅山猪优良公猪的耳组织,建立成纤维细胞系,并以其为供体进行克隆猪的生产; 2、对获得克隆猪进行生产和繁殖性能测定; 3、采集上海地区梅山猪保种场的全部配种用公猪和繁殖母猪的耳组织,建立成纤维细胞系后冷冻保存。详尽记录每个保存样品所个体的体型外貌及特征（个体照片、毛色、头型、耳型、体高、体长、体重等）、繁殖性能（性成熟月龄、配种月龄、发情周期、各胎次产仔数等）及其他资料。从而静态的保存梅山猪在上海地区的遗传多样性。 4、创见与创新 1、首次以已知繁殖性能的梅山猪耳成纤维细胞为供体,以体细胞克隆技术进行优良公猪的生产。 2、首次全面建立上海地区梅山猪的细胞库,为猪种质资源的长期保存提供了一个全新思路。 5、经济效益和存在的问题 通过本课题研究,我们建立了猪体细胞克隆技术,并在部分地方猪种保种中进行应用,使这一技术能在我国地方猪种种质资源保存中发挥积极作用。同时我们认识到这一技术还有待进一步的完善,主要表现在： 1)目前克隆效率不高,实用价值仍较低,需进一步完善猪体细胞克隆技术进一步优化猪体细胞核移植操作程序,完善各个环节,提高成功率;研究中发现大量的克隆胚胎移植母猪在妊娠中期以前发生流产,因此今后研究重点是受体母猪受孕的维持,从而提高克隆效率,使之更具实用价值; 2)改进现有猪胚胎移植技术,开发非手术法移植技术（如腹腔镜导向胚胎移 植技术、内窥镜导向胚胎移植技术等）,从而使猪胚胎冷冻技术更具实用性。