[00146198]黑麦抗白粉病基因Pm20 的精细定位和病程相关基因的克隆及功能分析

白粉病是小麦最严重的病害之一，研究小麦抗白粉病的分子遗传学基础，对于阐明抗病机理和小麦分子改良有重要意义。Pm20 是一个来自黑麦的抗小麦白粉病基因位点，位于6R 染色体的长臂上，对我国主要的白粉菌生理小种免疫或高抗，具有广阔的育种应用前景。本课题用一对Pm20 基因位点的近等位突变系（分别有和无Pm20 位点的小麦-黑麦6BS/6RL 易位系）为材料，运用RT-PCR 技术对接种和未接种条件下的基因差异表达进行了展示，通过对差异表达的基因片段进行回收、克隆和测序得到多个抗白粉病病程相关基因；Blast 分析显示其中的四个与目前分离得到的典型抗病基因具有高度的同源性。利用RACE 结合电子克隆的方法我们得到其中两个基因的全长序列，它们的开放阅读框（ORF）分别为3702 bp 和4239 bp，结构分析显示它们均属于CC-NBS-LRR 抗病基因家族。这两个Pm20 的候选基因暂时被命名为Pm20-C1 和Pm20-C2。基因组PCR 进一步证明了Pm20-C1 和Pm20-C2 都来自黑麦6RL 染色体。目前基于单细胞瞬时表达技术的功能验证正在进行中。