[00146444]hMIP-1β基因克隆及其转基因瘤苗治疗恶性肿瘤的实验研究

肿瘤生物治疗是继肿瘤手术治疗、化疗、放疗之后的一种新的治疗模式，在临床治疗中已呈现出确切疗效和良好的应用前景。开发新的免疫基因治疗途径，更有效的治疗肿瘤一直是肿瘤研究的热点，2000年以来，我们课题组就开展了趋化因子抗肿瘤作用的研究，发现人巨噬细胞炎性蛋白-1β（human macrophage inflammatory protein-1 beta，hMIP-1β）是一种新发现的新型趋化因子，对多种效应细胞包括T细胞、B细胞、单核细胞、树突状细胞等具有显著的趋化作用，有明显的抗肿瘤作用。2004年，我们以“hMIP-1β基因克隆及其转基因瘤苗治疗恶性肿瘤的实验研究”申报广西科技厅项目并获得立项资助（合同编号：桂科青0447049）。　　该项目通过对腺病毒载体介导的hMIP-1β基因转染肿瘤细胞的生物学特性、hMIP-1β基因修饰瘤苗免疫小鼠产生的免疫保护作用和AdhMIP-1β对荷瘤小鼠的治疗作用，及其抗肿瘤机理等进行了系列研究，取得多项有意义的研究结果：　　1、可大量扩增和纯化AdhMIP-1β，病毒滴度为5.6×109pfu/ml。　　2、AdhMIP-1β可介导hMIP-1β基因高效转染CT26细胞并表达hMIP-1β，对CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞及未成熟树突状细胞有显著的趋化作用。　　3、hMIP-1β基因修饰的CT26细胞的致瘤性显著下降。　　4、hMIP-1β基因修饰的CT26细胞瘤苗免疫小鼠能诱导机体产生显著的免疫保护作用，抵抗亲代肿瘤细胞的再攻击。　　5、将AdhMIP-1β直接瘤体内注射治疗荷瘤小鼠，疗效显著，肿瘤生长受抑甚至消退，小鼠生存期显著延长。　　6、hMIP-1β基因修饰的肿瘤特异性树突状细胞疫苗的抗肿瘤作用显著增强。　　7、腺病毒介导的hMIP-1β基因转染肿瘤细胞的抗肿瘤机理为，将hMIP-1β基因导入肿瘤细胞使其高效表达，能有效趋化免疫效应细胞如T细胞、NK细胞、单核细胞、树突状细胞等到肿瘤局部，诱导肿瘤特异性CTL杀瘤活性和非特异性NK杀瘤活性；同时浸润细胞通过产生大量炎症因子和细胞毒作用，抑制或直接杀伤了肿瘤细胞，从而发挥高效的抗肿瘤作用效应。　　8、腺病毒载体介导的hMIP-1β基因转染肿瘤细胞是一条很有应用价值和前景的肿瘤免疫基因治疗途径，该研究为肿瘤免疫基因治疗提供了崭新的策略和思路。　　该项目研究结果经文献查新机构检索国内外文献，认为该项目研究的创造性和先进性为：　　（1）该项目在国内外首次报道了通过腺病毒载体介导可将hMIP-1β基因高效转染小鼠结肠腺癌CT26细胞和表达hMIP-1β，并诱导机体产生显著的抗肿瘤作用。一方面，hMIP-1β基因修饰的CT26细胞瘤苗免疫小鼠能诱导机体产生显著的免疫保护作用，抵抗肿瘤细胞的再攻击；另一方面，将AdhMIP-1β直接瘤体内注射治疗荷瘤小鼠，疗效显著，肿瘤生长受抑甚至消退，小鼠生存期显著延长。　　（2）该项目在国内外首次报道了hMIP-1β基因修饰的肿瘤特异性树突状细胞疫苗的抗肿瘤作用显著增强，能更有效的诱导肿瘤特异性CTL活性，使免疫小鼠产生更强烈的免疫保护作用，抵抗肿瘤细胞的再攻击。　　（3）该项目构建的腺病毒载体介导的hMIP-1β基因转染肿瘤细胞是一条很有应用价值和前景的肿瘤免疫基因治疗途径，为肿瘤免疫基因治疗提供了崭新的策略和思路。经广西区科技厅组织鉴定委员会对该项目进行成果鉴定，专家一致认为，“该研究成果科学性强，研究方法和手段先进，提交鉴定的资料齐全，研究数据科学、准确，结论可靠。该成果经文献查新机构检索国内外文献，未发现密切相关的文献报道，具有先进性和创新性，为肿瘤免疫基因治疗提供了崭新的策略和思路。成果具国内领先水平。”