[00146608]结核分枝杆菌(TB-SA)核酸扩增(PCR)荧光检测试剂盒

①课题来源与背景：　　由于中国结核疫情日趋严重，政府高度重视。由于当前国内外使用的结核诊断方法已沿用数十年，存在一定不足，为实现对WHO提高“结核发现率”的承诺，国家鼓励研发快速、准确、灵敏的新型结核诊断试剂。国家发展改革委组织实施“生物疫苗和诊断试剂高技术产业化专项”的重点也是开展新型诊断试剂的技术开发和产业化产品。基于此，公司在此前公司研究人员全球范围内独家发现的TB-SA基因的基础上，研制发明了该结核诊断试剂盒。　　②技术原理及性能指标；　　技术原理：一个良好的分子生物学诊断试剂盒的技术关键是选择到特异性极高的靶位基因。公司研发团队全球范围内首先发现一种结核杆菌特有的高特异性的蛋白抗原 TB-SA；研究发现，表达该蛋白抗原的基因是分子诊断理想的靶位基因：TB-SA具有极高的特异性，只存在于结核分枝杆菌和与其紧密相关的同类致病菌中，而不存在于环境中其他非致病性分枝杆菌中。且TB-SA基因存在于结核杆菌的染色体DNA上， 很稳定，只有一个拷贝，其序列也不具有移动子的特征。在GenBank中作DNA和氨基酸序列搜寻也表明，此基因及其蛋白也不存在于任何其他种类的细菌（如大肠杆菌等）、真菌、病毒等微生物中。在此基础上，研发该试剂盒。　　性能指标：　　准确性：在1：25～1：100血清稀释范围内，相对回收率接近于1。　　测定限度：OD405=0.317；检测敏感性：阳性血清稀释度小于1：800。　　特异性：临床常见病理和干扰性化合物对试剂盒的检测无影响。　　精密性：试验内精确性CV＜10%，试验间精确性CV＜15%　　③技术的创造性与先进性；　　该项目产品技术具有自主知识产权，居国际领先水平，为国际国内首创。　　根据查新报告显示，该项目产品在国际国内尚无其他单位进行研究开发和生产。参与项目临床验证的国内一流结核临床专家一致认为：此产品解决了目前国内外同类产品存在的PCR假阳性高、ELISA灵敏度低的缺陷，对于提高中国结核病诊断准确率和发现率具有重大的临床意义，尤其对于提高菌阳病人诊断的准确率、提高菌阴肺结核病人和肺外结核病人的检测率具有深远影响。　　④技术的成熟程度，适用范围和安全性；　　本试剂盒已研制成功，产品已获国家食品药品监督管理局颁发新药证书及生产批件，即可投产。　　该产品经中国药品生物制品检定所检定质量稳定，经1000余例临床研究结果证明：本产品使用方便、安全，诊断准确性好、灵敏度高、特异性强，对结核病诊断尤其是当前最难诊断的菌阴结核和肺外结核极具临床应用价值。　　⑤应用情况及存在的问题；　　本产品已北京结核病胸部肿瘤研究所、山东省胸科医院、成都市结核病防治医院共同完成临床研究，临床病例达1000多例。临床研究结论为：该试剂盒诊断结核病具有较好的敏感性和特异性，是结核病尤其是菌阴结核病及不易取得细菌学检查标本的肺外结核病诊断和鉴别诊断的可靠手段，有临床推广应用价值。