[00146942]类芽孢杆菌BD3526抑菌活性物质的初步分离及性质测定

类芽孢杆菌属（ Paenibacillus sp．） 细菌是广泛存在于自然界,好氧或兼性厌氧、产生抗逆性内生孢子的杆状细菌,其生理特性丰富多样,是土壤和植物微生态优势种群之一。类芽孢杆菌原属于芽孢杆菌属,1994 年Ash 等基于分子生物学的研究结果,将其从芽孢杆菌属中独立出来,成立类芽孢杆菌属。类芽孢杆菌属的菌株在生长过程中,能产生耐热抗逆的芽孢,有利于其在环境中存活、定殖与繁殖,在产品开发中因较非芽孢杆菌属细菌有效活菌数量高、性能稳定等优势而备受瞩目,是芽孢杆菌中比较具有应用潜力的菌种之一。其中某些菌株也是重要的植物生防细菌和植物根际促生菌,并且在农业领域已得到广泛的应用。类芽孢杆菌中的某些菌株,在代谢过程中可产生如多糖、酶、拮抗蛋白、抗生素、植物激素、絮凝剂等多种生物活性物质,这些活性物质在环境治理、植物病害防治以及畜牧业方面具有诱人的应用前景。在其产生的抑菌物质中,最主要的是多粘菌素（ polymyxin） ,它是由多种氨基酸和脂肪酸组成的碱性脂肽类抗生素,有A、B、C、D、E 五中类型,分子量都在1200 Da 左右,对G-菌有明显抑制作用。目前研究较多的是多粘菌素B,它除了对G-菌有明显杀菌作用外,还能对其产生的内毒素有一定的抑制作用,但由于其本身的肾毒性和神经毒性,一度限制了它在临床上的应用。还有一类尚未统一命名,它们都含有一个稀有脂肪酸侧链,即15-胍基-3-羟基十五烷酸（ GHPD） ,这类物质主要包括gatavalin,fusaricidins A、B、C、D 或LI-F 系列抗生素,分子量大都是900 Da 左右,对白色念珠菌、酿酒酵母菌、黑曲霉、米曲霉、尖孢镰刀菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌等具有很好的拮抗作用。本文对Paenibacillus sp． BD3526 产生的类细菌素抗菌物质进行了研究,为今后该菌在医药、食品和饲料加工等领域的应用提供理论依据.本实验以一株类芽孢杆菌BD3526为研究对象,采用丙酮浸提菌体得到抑菌活性粗品,通过Sephadex LH-20对样品进行初步纯化,结果表明粗品对藤黄微球菌CGMCC1.1848的最低抑菌浓度（MIC）为12.5 mg/m L,对金黄色葡萄球菌CGMCC1.879和单增李斯特菌CGMCC1.9136的MIC为25 mg/m L;Sephadex LH-20纯化样品对藤黄微球CGMCC1.1848的MIC为1 mg/m L,对金黄色葡萄球菌CGMCC1.879和单增李斯特菌CGMCC1.9136的MIC为2 mg/m L。样品经链霉蛋白酶处理后,活性基本消失。经加热、酸碱、胰蛋白酶、胃蛋白酶、脂肪酶、蛋白酶K处理后,活性没有明显变化。因此,类芽孢杆菌BD3526产生的是一种细菌素类的抑菌物质,该抑菌物质在食品和医疗行业有广阔的应用前景。