[00147466]院内制剂清毒栓的临床前研究

1、项目简介 课题来源：本课题研究任务来源于吉林省科技发展计划项目“院内制剂清毒栓的临床前研究” 课题背景：子宫颈癌在女性生殖系统恶性肿瘤中的比例占一半以上,已经在全世界女性因癌致死的病因中居第2位,我国宫颈癌的发生,在地理分布上的特点是高发区常连接成片,各省宫颈癌相对高发区的市、县也常有互相连接现象。宫颈癌患者的平均发病年龄,各国、各地报道也有差异,我国发病年龄以40～50岁为最多,60～70岁又有一高峰出现,20岁以前少见。给众多妇女及其家庭带来严重的威胁与沉重的负担。随着中医药的发展并逐渐受到国际医疗领域的关注,越来越多的学者们投入到对中医药防治疾病的探索中来,近年来关于中医药防治宫颈癌的研究也逐渐成为热点。 2、技术原理及性能指标 技术原理：本课题建立清毒栓的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱分析方法,为其内在质量评价积累数据,通过细胞实验从分子水平探讨清毒栓治疗宫颈癌的作用机制,以其用在临床推广应用,解决患者病痛,获得较好的的社会效益及经济效益。 性能指标： （1）清毒栓药物主要成分的含量测定。 （2）通过细胞实验,将清毒栓分成高中低不同浓度组,比较不同浓度组对Siha细胞抗肿瘤机制。 3、技术的创造性与先进性 （1）利用现代先进技术通过液相中药指纹图谱确诊清毒栓中主要成分; （2）通过细胞实验,将清毒栓分成高中低不同浓度组; （3）比较不同浓度组对Siha细胞抗肿瘤机制。①通过AO/EB TUNEL 线粒体膜电位,检测清毒栓高、中、低剂量作用于人宫颈鳞癌Siha细胞探讨清毒栓对诱导细胞凋亡的作用机制。②通过RT-PCR,western blot,caspase3,细胞色素C（线粒体）检测清毒栓高中低剂量作用于人宫颈鳞癌Siha细胞从分子水平进一步探讨清毒栓治疗癌HPV相关宫颈癌细胞抗病毒、抗肿瘤机制。 4、技术的成熟程度、适用范围和安全性 （1）通过cck-8检测法确定中药清毒栓作用于宫颈癌Siha细胞的最佳时效点,支持下一步的实验研究。 （2）通过AO/EB检测法、线粒体膜电位法探讨清毒栓对诱导宫颈癌SiHa细胞凋亡的作用机制。 （3）通过TUNEL法、流式细胞仪检测法探讨清毒栓对抑制宫颈癌SiHa细胞增殖的作用机制。 （4）通过Western Blot印迹法检测蛋白质caspase-3探讨清毒栓对诱导宫颈癌SiHa细胞凋亡的作用机制。 （5）清毒栓的HPLC指纹图谱研究的工作报告。 5、应用情况及存在问题 本研究限于实验条件、时间、精力的不足,还存在许多不足之处,虽然达到了预期目标。但实验过程中一些不可控因素的影响可能对实验结果产生一定的影响。