[00148158]蒺藜皂苷激活PKCε和ERK1/2生物靶点抗心脑缺血作用机制及物质基础的活性分析

蒺藜皂苷胶囊制剂是吉林省上世纪八十年代批准的抗心脑缺血的药物（商品名心脑舒通）,临床应用具有较好的治疗效果,但并未进行系统的药理作用与作用机制的研究。 本课题组自2000年起,采用化学药物方法（垂体后叶素、异丙基肾上腺素、阿霉素等）,物理方法（结扎冠脉、血瘀模型）,制备啮齿类及非啮齿类多种动物模型,从整体实验水平证明,无论口服或注射给药均具有确切的抗心脑缺血作用,同时亦观察到蒺藜皂苷具有改善血液流变学、抗血小板集聚及降血脂作用。基于上述研究,对蒺藜皂苷的口服制剂进行二次开发,成功制备注射用蒺藜皂苷,按新药开发进行了药效学、毒理学、一般药理学等实验研究。2002年国家FDA批准临床试验研究,2006年完成Ⅱ、Ⅲ期临床试验,其临床试验显示较好的治疗效果。本课题组自2003年起采用分子生物学的方法、膜片钳技术,历经五年时间,以心肌细胞及神经功能样细胞PC12细胞为工具,在分子水平探讨蒺藜皂苷的作用机制。从PKC-MAPK线粒体凋亡通路,阐明蒺藜皂苷对PKCε/ERK1/2信号通路的生物学靶标作用。揭示了PKCε膜转位、ERK1/2核转位,激活凋亡相关蛋白Bcl-2表达增加,Bax表达下降,抑制caspase-3的活性。从信号转导通路水平阐明抗凋亡的分子机制,对PC12研究中,阐明对神经细胞内NO、游离钙、NF-κB等的影响,同样揭示PKCε及ERK1/2的生物学靶标作用。在离子通道水平,观察到在氧化损伤状态,蒺藜皂苷对KATP通道的作用,以及对缺血预适应、缺血后处理的干预作用。 自2008年起本课题组对蒺藜皂苷的化学物质基础进行了深入研究,成功分离出九种单体皂苷。完成其结构确认,利用培养心肌细胞逐一进行了生物学活性筛选,从中获取了两种具有确切抗心肌细胞氧化损伤作用的单体皂苷,并完成了机制研究。 近七年来,在吉林省敖东洮南药业和科技厅课题经费支持的基础上,获三项国家自然科学基金及一项高校博士点基金的支持。 在此项研究的团队中,培养硕士13名、博士5名,均获相应的学位。发表系列学术论文42篇,均为作用于心脑血管方面的系列文章。吉林大学对此课题予以充分重视,在吉林大学学报（医学版）开设研究专题栏目,一次性发表5篇学术论文。单体皂苷研究方面发表在sci收录刊物。全部论文被引350次,其中他引208次。 本课题的实验结果先后六次在全国药理学学术会议及海峡两岸心血管疾病研讨会上报告。 本项目于2008年11月获吉林省科技进步一等奖。 本项研究成果对蒺藜皂苷的临床应用起到很大的推动作用,对心脑缺血患者达到很好的治疗效果,产生了较大的社会效益和经济效益,近三年来企业年收入均在亿元人民币以上,以30﹪的速率逐年增加。