[00148513]以TREK-1为靶标的前列腺癌快速检测试剂盒

1.本课题来源于吉林省中小企业创新基金。背景：为了预防前列腺癌的发生和掌握其发病情况,目前唯一能够早期检测前列腺癌的方法是PSA检测,人们可通过检测血液中PSA水平筛查高危人群。但是该方法有其自身缺陷,假阳性率较高。PSA检测缺陷颇多。因此开发新的灵敏、快速的前列腺癌筛查方法变得越来越重要。 2.技术原理及性能指标 研究发现钾离子通道TREK-1在前列腺癌细胞中大量表达,而在正常组织中几乎没有表达。越来越多的研究结果显示,钾离子通道TREK-1可以做为前列腺癌检测和新型治疗药物研发的靶标。钾离子通道TREK-1是一种跨膜蛋白,一部分结构位于细胞膜外适合与单克隆抗体作用,单克隆抗体可以特异性地作用于特定的抗原决定簇。而抗原抗体的结合反应特点是特异性强,灵敏度高,非常适合快速检测及大规模筛查的要求。利用TREK-1抗体开发的检测试剂与相关检测样本的特异性高,灵敏度达到96%以上。利用96孔酶标板进行检测,检测的样本量达到90人份以上。 3.技术的创造性与先进性 本项目的目标产品是以在前列腺癌细胞表面大量表达TREK-1为靶标的前列腺癌酶联免疫试剂盒。目前,前列腺癌快速检测试剂都是以PSA为检测靶标的。进入中国市场的国外公司及产品主要是CanAg Free PSA/ PSA EIA 试剂盒、美国ENE公司出品的游离前列腺特异性抗原（f-PSA）酶免定量检测试剂盒等。进口产品价格昂贵,不适合于临床的大规模筛查;国内的定量检测fPSA/PSA的试剂盒,灵敏度、稳定性与进口产品尚存在一定的差距,而且多数产品属于仿制,没有自主知识产权。因此,制备和开发具有自主知识产权的特异、灵敏、低成本的诊断产品以及相关方法是必须的。本产品以钾离子通道TREK-1可以做为靶标,通过美联免疫吸附技术对前列腺癌进行检测。其反应特点是特异性强,灵敏度高,非常适合快速检测的要求。 4.技术的成熟度,适用范围和安全性 钾离子通道是细胞膜上一类特殊的蛋白质微孔道,对细胞的功能和功能调节具有十分重要的作用。近年来发现肿瘤细胞膜上也分布着不同类型的钾离子通道,并与肿瘤的发生发展密切相关。钾离子通道可以通过影响肿瘤细胞膜电位,导致胞外钙离子内流或细胞体积发生改变,从而影响肿瘤细胞的增殖。钾离子通道基因也与肿瘤的形成有关,在多种癌组织中高表达,并与淋巴结转移有关。过去的十年的研究显示,前列腺癌细胞的15-LOX的表达发生明显变化,这个酶与多不饱和脂肪酸的代谢有关。研究发现,钾离子通道TREK-1可能与此代谢过程有关。TREK-1是的单体是由两个孔状环结构组成的,完整的通道是由二倍体构成。这个离子通道广泛表达在神经元细胞中,通过膜电位调节细胞的兴奋性。该通道对脂肪敏感,其调节既不依赖电压也不依赖时间;它的活化通过不饱和脂肪酸,调节依赖磷酸化。研究显示,该通道可能参与细胞增殖的调节。相关研究数据表明,TREK-1与癌症有关。近期的研究发现,TREK-1在正常的前列腺上皮细胞和患恶性肿瘤的前列腺上皮细胞中被不同的脂代谢机制调节,并导致细胞增殖的变化。通过对人源的前列腺正常细胞和癌细胞以及细胞系的研究发现,TREK-1过量表达在前列腺癌细胞中。如果通过基因敲除的方式抑制该通道在PC3细胞的表达,影响其增殖。TREK-1表达在人的前列腺癌中,而在人正常前列腺组织中没有发现其表达,如果在正常细胞中过量表达TREK-1,则会大大提高细胞的增殖;如通过非特异性药物阻滞剂或基因突变抑制TREK-1的活性将会减少癌细胞的增殖,接近正常细胞的水平。而且 该项目前期已进行过探索,完全可行。 在我国,预计今后5～10年内前列腺癌将成为我国老年常见的恶性肿瘤。但遗憾的是,许多病人就诊时已达晚期,从而失去了治疗机会。为此,专家呼吁,50岁以上的男性应高度警惕前列腺癌的发生。我国前列腺癌发病率虽低于西方国家,但随着PSA及其他检测方法的广泛应用,前列腺癌的发病率和检出率逐渐增高。这表明,未来我国对于高质量的前列腺癌诊断产品的需求将越来越大。本产品的客户群为国内外中老年男性,经过市场调研,本产品上市后市场占有率可达到30%。 由于项目产品是利用检测者的前列腺液进行检测,既减少了检测者的痛苦,而且无任何副作用。 5.目前产品已进入中试阶段。项目启动实施后,本公司与中国人民解放军208医院,吉林大学第二医院等单位联合开展项目。解决了项目研发过程中样本来源问题,采取多方合作,解决了样本来源单一的问题。TREK-1:一种钾离子通道蛋白