[00150055]5种食源性病原微生物快速检测板

1、课题来源与背景 近年来,随着食品安全事件的不断发生,食品安全问题已经成为各国政府及人们关注的焦点,我国政府不断加强监管的力度,在日常监督及风险监测上,基本覆盖了所有的产品类型,这给食品检验机构带来相当大的压力,尤其是在广州市地区,食品生产加工、销售及餐饮服务企业众多,监管任务重,样品数量庞大,且随着《食品安全国家标准 食品中致病菌限量》以及新的食品安全国家产品标准颁布实施,要求1个样本一次性检验5份,样品检验量扩大为5倍,检验机构越来越不能承受高负荷的检验任务。并且我市每年都有大量的会议保障任务,尤其强调实效性和准确性,现有的传统检验方法时效性差（致病菌5-7天,甚至更多）,检验程序复杂,不能满足餐饮安全保障工作要求。为了顺利实现我市扩大食品安全监测的范围,保证我市食品安全监管的顺利进行,保障广大消费者餐桌的食品安全,迫切需要研究开发适合我国国情的食源性病原微生物快速检验筛查技术及相应产品来解决这一问题。因此,在广州市科创委及白云区科技和信息化局的大力支持下,“食源性病原微生物快速检测板的研制与应用”项目获得了2015年广州市科技计划项目科学研究专项立项,该项目实际开展时间为2014年,获得专项支持后,于2015年加大研发投入,加快研发进度,至今已基本完成项目所规定的各项经济技术指标。 2、技术原理及性能指标 本项目主要研究开发5种病原微生物快速检测板,包括：金黄色葡萄球菌检测板、沙门氏菌检测板、阪崎肠杆菌检测板、李斯特菌检测板、大肠杆菌O157检测板,可以用来进行食品微生物的检验。该研究是以新型配方的酶触反应技术与液体凝胶技术及模板制备技术相结合的综合技术体系研制的,包括开发并设计一个检测板模型、研制一套与模板高度配套的液体凝胶配方、5种病原微生物快速检测板专用选择性显色培养基配方,及研究5种病原微生物快速检测板在各种食品中应用情况。产品具有性能可靠、产品准确度高、检验快速（15～24h出结果）、操作简单等优点,与国内测试片类产品相比,提高了检测灵敏度和特异性,通过验证,产品特异性和灵敏度达到90%以上,准确度（样品检测符合率）＞90%,最低检测限能达到100CFU/mL。项目完成时,申请发明专利2项,实用新型专利1项,获得2项授权,在中文核心期刊上发表论文3篇。 3、技术创新性与先进性 本项目主要研究开发5种病原微生物快速检测板,包括开发并设计一个检测板模型、研制一套与模板高度配套的液体凝胶配方、5种病原微生物快速检测板专用选择性显色培养基配方, 解决了一些关键技术问题包括：液体凝胶配方的选择,检测板模型的开发设计,专用选择性显色培养基配方选择,筛选出能够抑制杂菌生长的抑菌剂、抗菌素及目标菌生长促进剂和营养配方,建立通用型的适合各种产品检验的病原微生物快速检测板等。 主要创新点包括：设计一套全新的微生物检测板模型,提高检测的准确度和操作使用通用性和便捷性;每一种检测板建立1套最优的试剂配方,提高检测的准确性,满足通用型的适合各种产品检验的要求;建立标准化作业的产品研制生产工艺,确保检测板质量稳定,重复性好,开发一条倒胶自动化作业流水线,提高生产效率,降低人为影响,提高产品质量;产品应用时,不用装入自封袋,可直接倒过来放入恒温培养箱进行培养,由于检测板独特设计的密封空间,培养和观察结果时,不用担心样品液渗漏,污染工作台,进而对操作人员造成安全风险,与测试片相比,操作更简单,更安全卫生。 4、技术成熟程度及应用情况 2014年始,项目承担单位就逐步开始尝试对检测板模型及配方的设计,2015年获得市科创委专项支持后,加大研发经费,组织项目研究人员集中攻克项目中的关键难点,确定了检测板模型、液体凝胶配方,并通过筛选出能够抑制杂菌生长的抑菌剂、抗菌素及目标菌生长促进剂和营养配方,逐一研究出5种不同的食源性致病菌的选择性显色培养基配方,进而获得通用型的适合各种产品检验的病原微生物快速检测板。 并由2家第三方检验机构进行测试分析,均给出了较好的评价,达到了既定的指标。通过标准菌株及大批量食品样品（粮食制品、饮料、肉制品、鲜奶发酵乳、冷冻饮品、即食调味品等）验证了产品在食品领域使用具有较好稳定性和准确度,且安全可靠。同时将该系列产品推广应用到食品企业及检验机构进行使用,实现销售收入总额24.7万元,获得用户的一致好评。 作为一种快速检测技术产品,食源性病原微生物快速检测板成本低廉、操作简单安全、降低环境污染及样品交叉污染的可能性、扩大了样品种类检测范围、准确率更高, 但由于食品样品种类繁多,不同食品类别中微生物菌群分布差异较大,特别是污染程度较高的风险类食品,对于目标微生物的检测干扰较大,不同基质的样品对检测板的显色效果有一定的影响,需要进一步根据使用过程中出现的问题,对产品进行不断优化和改进,保证产品质量的稳定和可靠性。