[00150122]γ-干扰素释放分析ELISPOT在人布鲁氏菌病中应用价值的研究

布鲁氏菌病是由布鲁氏菌感染所引起的人畜共患病,健康人主要通过接触病畜而感染,总之布病给人民健康及畜牧业带来巨大损失和影响。1955年,我国将布病列为乙类传染病后,我国人间布病疫情在20世纪50-70年代时较为严重,80、90年代基本得到控制,但自2000年以后又快速回升,2009年以来我国每年报告病例数均超过了35000例,2014年时达到58515例。2007年卫生部颁布的《布鲁氏菌病诊断标准》中所涉及到的实验检测,目前应用最为广泛的是虎红平板凝集试验及试管凝集试验这两种血清学试验,而这两种试验均是从体液免疫出发设计的试验方法,它们的检测效能并不是十分的出色,只能检测出血清中的完全抗体,因此诊断急性期布病时效能相对较好,但是针对发病半年以上尤其是一年以上的慢性期布病这两种方法因不能检测出不完全抗体而具有较高的假阴性率,同时这两种方法也容易与其他细菌感染性疾病发生交叉抗原抗体反应,而出现假阳性的试验结果。在当前我国布病疫情较为严重的时刻,本课题组为提高我国诊断布病的技术水平,从细胞免疫的角度出发设计试验,采用布鲁氏菌特异性抗原为刺激物,通过酶联免疫斑点试验,检测由特异性抗原刺激T淋巴细胞分泌γ-干扰素的释放量来诊断其是否感染了布鲁氏菌。这种酶联免疫斑点试验,因使用了布鲁氏菌特异性外膜蛋白做为抗原所以具有较高的诊断特异性,也不会像血清凝集试验那样遇到慢性期布病因不完全抗体的产生而造成假阴性的结果。酶联免疫斑点试验是近20年来发展起来的检测抗原特异性T细胞的技术,是目前最敏感的检测抗原特异性T细胞的方法之一。目前,该方法已成熟应用于结核病的诊断。通过使用布鲁氏菌特异性外膜蛋白抗原进行酶联免疫斑点试验来诊断布病相比较传统的血清学凝集试验来说,具有较高的灵敏度和特异度,能够很好的诊断亚临床型、急性或亚急性、局限型、复发性感染和慢性等各型布病。