[00150125]孕妇血浆中父源性胎儿游离DNA分离检测技术在产前无创诊断中的应用研究（面上）

课题来源与背景：母亲和胎儿的游离细胞DNA一起在母体血液中流动。游离细胞胎儿（cff）DNA使得对因性侵犯而怀孕的妇女进行无创性产前亲子鉴定成为可能。cff DNA和相对大量的游离细胞母体DNA形成一种不平衡混合斑,研究表明Y-STR、SNP-STR和DIP-STR在分析这种类型的不平衡混合斑中表现良好。 研究目的与意义：本研究利用SNP-STR、DIP-STR与SNP-SNP三种复合遗传标记,分别根据相应的等位基因特异性引物扩增的原理对这三种标记进行检测分析,并靶向分析主要成分DNA（血浆中母体DNA）中的次要成分DNA（血浆中游离细胞胎儿DNA）,以探索这三种复合遗传标记及检测方法在无创产前亲子鉴定中的可行性 主要论点与论据：SNP-STR、DIP-STR与SNP-SNP三种复合遗传标记扩增子片段较小,且多态性较高,是作为混合斑检测分析较为理想的标记。 创见与创新：本研究将ARMS-PCR技术应用于检测SNP-STR、新建ARMS-PCR结合SNaPshot技术检测一组新的SNP-SNP、基于理论计算提出将SNP-STR、DIP-STR及SNP-SNP标记应用于NIPAT,以及首次将SNP-STR应用于NIPAT,以上内容均属国内外首次提出。 社会经济效益,存在的问题：通过建立父源性胎儿游离DNA基因检测的基本方法,初步构建常见基因的检测方案,有利于大大降低对胎儿产前无创基因检测的成本,减少出生缺陷,有效利用新技术并促进新技术的发展,促进四川省医疗水平,产前无创基因检测能力的提高和发展。目前仅研究了6个SNP-STR位点在NIPAT的实际应用,识别效能不足;另外11个SNP-STR、7个DIP-STR及15个SNP-SNP位点仅研究了二人混合斑的识别效能,暂时还没有对NIPAT的应用进行研究,未来将针对其在NIPAT的实际应用进行进一步研究,并构建相应的科学的统计分析方法。为提高系统识别效能,未来也考虑联合多种标记构建复合检测体系,从而对NIPAT进行法医学研究。 历年获奖情况：无 本研究以等位基因特异性引物的原理为基础,先后分别成功利用ARMS技术对6个和11个SNP-STR标记,利用S-与L-引物对7个DIP-STR标记,以及利用ARMS-PCR结合SNaPshot技术对15个SNP-SNP位点进行检测分析,并且三种标记的灵敏度均较高,多态性表现良好。研究证实了其中6个SNP-STR标记利用ARMS技术在无创产前亲子鉴定中是实际可行的,另外11个SNP-STR、7个DIP-STR及15个SNP-SNP位点在二人混合斑识别中具有很大的应用价值,并且这些位点的扩增子片段均小于200bp,因此本研究设想这些位点在NIPAT领域也具有很好的应用前景。 相关研究结果已发表论文6篇,参加国际会议2次,申请发明专利1项。