[00150357]miR-let-7a抑制非IgA肾炎细胞增殖的PKM2通路研究

慢性肾小球肾炎病理类型多种多样,其中系膜增生性甚小肾炎是最主要的类型之一,也称为非IgA系膜增生性肾小球肾炎。系膜增生性肾小球肾炎临床表现多样,蛋白尿从微量到肾病综合征范围,血尿发生率30％～80％,重度系膜增生性肾小球肾炎易发生高血压和肾功能减退。在系膜增生性肾小球肾炎病理诊断的基础上,寻找敏感、特异的蛋白分子作为系膜增生性肾小球肾炎病理改变程度的标志对其诊断与治疗有一定的帮助。 根据近年来报道, miRNAs在非IgA系膜增生性肾小球肾炎形成中发挥重要作用。miR-let-7a发挥功能是通过结合调节非IgA系膜增生性肾小球肾炎的靶向基因,调控靶向基因的信号通路,从而影响非IgA系膜增生性肾小球肾炎细胞的生物行为。丙酮酸激酶M2（PKM2）作为肾脏细胞依赖的糖酵解代谢中的关键酶,抑制PKM2的表达可以抑制肾脏细胞的生长和存活。有实验证明miR-let-7a与PKM2的信号通路有密切关系,miR-let-7a拮抗PKM2的表达会产生一定抗非IgA系膜增生性肾小球肾炎效应。 目的：证明miR-let-7a与PKM2的信号通路有密切关系,miR-let-7a拮抗PKM2的表达会产生一定抗非IgA肾炎细胞增殖。方法：1.运用Real-time PCR检测miR-let-7a在非IgA肾炎细胞和正常肾脏组织、细胞中的表达情况;2.免疫组织化学方法、Real-time PCR和Western blot分别检测PKM2在非IgA肾炎细胞和正常肾脏组织、细胞中的表达情况;证实miR-let-7a与PKM2 mRNA、蛋白呈负相关性。结果：我们发现miR-let-7a在非IgA肾炎细胞表达减少, 然而, PKM2在非IgA肾炎细胞表达增加（p ＜ 0.001）。据统计,miR-let-7a、PKM2 mRNA和PKM2蛋白负相关（分别为p = 0.013,p = 0.013）。结论：我们的结果表明,miR-let-7a通过下调PKM2来抑制非IgA肾炎细胞。miR-let-7a / PKM2通路对非IgA肾炎细胞病人可能是一个新的治疗靶点。