[00150688]一种海胆多糖的提取、纯化及鉴定方法

近年来,由传统中药及天然药物中分离得到的多糖类成分,因其广泛的生物活性已成为研究的热点。据研究表明,海胆多糖是一种硫酸多糖,具有抗凝血、降血脂、抗慢性肾衰、抗肿瘤、抗病毒、促进组织再生、抑制胃溃疡、增强机体免疫机能等多种生理活性。而多糖类物质的提取多采用水提法、酸提法、碱提取法等,具有耗时、提取率低、污染环境等缺点。近年来,随着超声波技术、微波技术的发展,这两种方法成为颇具发展潜力的新型辅助提取技术。我们采用超微粉碎机将海胆进行预处理,大大缩短了微波提取和壳聚糖固定化酶提取时间,提升了提取率,其特点是节能、节省溶剂、污染小、且可避免高温引起的分解。同时,采用超微粉碎与微波提取结合使用的方法,增加了海胆多糖溶解性,改变了常规方法提取的海胆多糖提纯后,不溶于冷水,易溶于热水、DMSO、不溶于一般有机溶剂的特性,易于海胆多糖药物生产过程的质量控制。针对提取纯度越高,生物活性越差的不足,我们以单克隆抗体技术为基础,采用免疫亲和层析法纯化多糖。利用抗原与抗体的特异性结合反应,可获得满意的纯化效果,其选择性强、纯化效率高。 动物多糖的鉴别及质量控制一直是个难题。薄层色谱虽然简单、快速,但只局限于单糖、寡糖成分的鉴别,因此,动物多糖必须降解获得单糖、组成成分或者其结合的氨基酸类成分才能进行鉴别分析,导致实验误差。而传统大型仪器如高效液相色谱法、质谱、核磁共振等大多前处理周期长,费用高,处理量有限。 因此,寻找动物多糖的新型鉴别方法,对于多糖类药物的质量控制具有十分重要的现实意义。