[00022836]牛奶蛋白质分离纯化技术
技术详细介绍
本项目以转基因奶牛乳汁分泌的乳铁蛋白和乳清白蛋白为目标蛋白，建立了转基因动物乳腺反应器分离纯化药用蛋白质的平台技术，可实现转基因牛奶蛋白的高效规模（200L/批）纯化制备。通过对酪蛋白沉淀、组合层析和膜过滤分离等重组蛋白大规模纯化技术和纯化过程的研究，建立了转基因人乳铁蛋白纯化工艺，并进行放大，处理量达200L牛奶/批，活性收率>90%，纯度>95%，制备得到3000g人乳铁蛋白；采用了创新的硫铵沉淀＋疏水层析工艺，经质谱验证实现了对性质相近的同源蛋白人乳清白蛋白和牛乳清白蛋白的分离，该技术正在申请专利保护。技术指标和优势：建立了转基因动物生产的人乳清白蛋白、人乳铁蛋白质的高效规模化制备技术，具备如下特点：①通过SPG膜乳化技术，制备具有纳米孔道结构的微球，用于高效分离纯化目标蛋白；②应用大孔吸附介质，实现人乳清白蛋白、人乳铁蛋白等目标蛋白的高通量分离和纯化，最大流速、载量和目标蛋白的回收率接近或超过进口同类产品；③建立了中低压多柱层析组合的制备工艺，将工艺和设备进行了放大，规模达到日处理乳液200升，人乳铁蛋白的回收率达到90% 以上，纯度大于95%。
