[00024150]一种高效纯化金属离子结合蛋白的疏水层析分离纯化方法
技术详细介绍
摘要：本发明一种高效纯化金属离子结合蛋白的疏水层析分离纯化方法，其步骤为：选取含有金属离子结合蛋白的待分离物料，添加沉淀剂进行沉淀粗分离获得蛋白混合物。在蛋白混合物中添加过量的螯合剂去除目标蛋白的辅基金属离子I，透析去除螯合剂后添加适量不易沉淀的金属离子II，以保持目标蛋白的三级结构。将处理所得蛋白混合物进行疏水层析分离操作，并在层析缓冲液中添加适量的金属离子II，由于金属离子辅基II可以有效地保持目标蛋白的天然结构，因此可以有效地提高目标蛋白与杂蛋白在疏水层析中的分辨率。进一步通过凝胶过滤层析可以得到高纯度、高回收率的金属离子结合蛋白的纯品，生产工艺稳定，适于规模化生产。
