[00035396]重要传染病诊断和治疗新技术的研究

项目简介： 传染病是危害人类健康、导致死亡的重要原因，控制传染病是医学研究领域的重点。传染病 控制的难题在于病原体的高通量、快速诊断，以及现症患者的治疗。本项目从传染病的高通量、快速诊断技术和常见难治性病毒感染的治疗技术两方面进行攻关，开发具有我省自主知识产权的诊断平台和治疗药物。 主要研究成果如下： 一、建立传染病的高通量、快速诊断技术平台： 1、建立56种病原体的高通量检测技术：通过生物信息学设计并合成56种病原体的特异性探针，将探针交联到微球上，通过杂交和在Luminex100 analyzer上进行检测，获得特异性的56种病原体的探针序列阳性标准品的实验结果。与现有同类技术如病原体分离培养、ELISA、药敏试验等相比较，灵敏度、特异性、可靠性均有显著提高。检测灵敏度98.5%,特异性达到99％，检测变异系数3.5％，检测时间仅为1小时，与病原体分离培养、药敏试验需要24小时和ELISA试验需要2小时相比，检测时间不到对照法的50％。 2、研发出呼吸道病毒的高通量诊断芯片：通过设计和合成探针序列，构建芯片，标记探针，提取病毒培养和病毒RNA，逆转录，PCR扩增，探针荧光标记和杂交与扫描等实验完成流感病毒检测，结果显示用该方法可以广谱的鉴定出流感病毒的相关亚型。 3、研发出用于26种HPV病毒型的检测与分型的液体芯片：本项目研究建立的人乳头瘤病毒检测及分型基因芯片，可灵敏地检测各种型别的HPV。 4、建立用于HBV定量和耐药性分析的方法: 获得HBV突变的LNA探针，可用于检测HBV耐药性分析。 二、研究重要传染病治疗新技术 1、建立治疗HBV病毒感染RNA干扰技术：本研究针对HBV S基因设计shDNA (small hair DNA)序列，建立了小片断干扰RNA体外抑制HBV表面抗原融合基因方法，腺病毒载体表达方法，并且在HepG2.2.15细胞中研究特异性的shRNA对乙肝表面抗原表达的抑制作用，以及HBV转基因小鼠体内实验验证其作用效果。 2、研发口服转移因子冻干粉制剂：冻干可提高多肽的稳定性，而且采用经冻干工艺生产，有利于该产品的活性存活，保证产品的质量，有利于产品的运输、贮藏，具有极大的优越性，国内外均未见同类产品，具有明显的创新性，正申报临床批文。 本项目发表SCI收录论文8篇，国内一级杂志18篇，合计他引25次，获得国家发明专利授权5项，申请号13项。