[00037562]青石斑鱼B淋巴细胞刺激因子基因与蛋白质的制备及应用
技术详细介绍
青石斑鱼B淋巴细胞刺激因子（BAFF）基因与蛋白质的制备技术，涉及青石斑鱼BAFF基因克隆、表达、蛋白纯化及活性鉴定技术。通过RT-PCR和RACE技术我们得到了青石斑鱼B淋巴细胞刺激因子的全长cDNA。它具有SEQ ID NO.1所示的序列，该基因CDS开放阅读框编码的蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。该胞外功能区可溶段连接到pET28a 原核质粒中并转到大肠杆菌BL21(DE3)中表达，Ni +-NTA柱纯化后得到的重组蛋白His6-EasBAFF，实验证明该融合蛋白能够明显促进青石斑鱼淋巴细胞以及小鼠B淋巴细胞的存活。
