[00045119]枯草芽孢杆菌氨肽酶的发酵制备及应用

　　本项目得到国家863计划资助。
　　1、项目简介
　　菌种来源于传统食品，鉴定为枯草芽孢杆菌，无安全性风险；发酵原料以农副产品为主，资源丰富，成本低；发酵周期短，能耗少，工艺相对简单；发酵菌株基因工程菌已构建成功，产酶水平提高潜力巨大；二次膜过滤组合步骤提取，收率高，步骤简化，废水排放少。最适pH在8～10，最适温度55℃；具备与碱性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、中性蛋白酶的良好匹配特性
　　2、创新要点
　　无酸性蛋白酶活性，而中性和碱性内切型蛋白酶的活性很低；；与ProteAX酶同样酶单位加量下比较，Zj016氨肽酶水解后的小肽含量更高，水解更加彻底。
　　3、效益分析
　　氨肽酶是一类蛋白质和多肽的外切酶，可从多肽链的N端顺序水解氨基酸。可协助切掉肽链末端疏水性氨基酸，脱除蛋白水解物的苦味；与内切型蛋白酶复配使用，在酱油酿造、干酪生产及其它蛋白水解产品的制备过程中，不仅可大幅度提高蛋白质的利用率，还可通过水解条件的优化控制制备活性多肽，达较高纯度后的酶也用做N端测序工具酶，医疗诊断用酶等。填补国内氨肽酶产品空白，替代进口产品；打破进口产品的垄断，增强国际竞争力；满足不断增长的对外切蛋白酶的市场需求；促进我国酶制剂行业的产品结构调整和升级；提高相关产业的加工水平和产品质量，降低生产成本。
　　4、推广情况
　　已在企业中试达产业化产酶水平，有小批量生产。
　　授权专利：
　　一种枯草芽孢杆菌脱苦氨肽酶的发酵制备与提取的方法 200910025603。6
　　一种提高液体氨肽酶稳定性的方法及该酶的应用 200910233288。6
　　一种枯草芽孢杆菌氨肽酶在紫菜复合酶解中的应用 201010578579。1
　　一种枯草芽孢杆菌氨肽酶在风味营养米制备工艺中的应用 201110362652。6
　　一种枯草芽孢杆菌在酵母抽提物制备中的应用 201110362653。0
　　一种原生质体转化选育高产亮氨酸菌株的方法 201210418605。3
　　一种丁二酸酐化学修饰提高ZJ016氨肽酶稳定性的方法 201210260550。8
　　一株耐热氨肽酶的产生菌及该酶的纯化方法 201310253385。8