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本发明属于生物技术领域,本发明公开了一种固定化生物酶及制备方法,其中,制备方法包括如下步骤:(1)分散:将氧化石墨烯分散于PBS中得到氧化石墨烯分散液;(2)氨基化石墨烯:将分散液加入1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐和N‑羟基丁二酰亚胺,再加入氨基化试剂,使氧化石墨烯表面氨基化,得到氨基化氧化石墨烯分散液;(3)固定化:将氨基化氧化石墨烯分散液离心,得到氨基化氧化石墨烯,将所述的氨基化氧化石墨烯分散均匀后加入戊二醛,向其中加入生物酶水溶液,共价固定氧化石墨烯表面的生物酶,洗涤,干燥,得到固定化生物酶。本发明的固定化生物酶粒径均一,对高温,强酸强碱稳定性较好。