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肺表面活性蛋白B前肽proSP-B是肺表面活性蛋白B形成过程中的一个前体蛋白,其在形成和调节肺表面活性蛋白B的形成过程中发挥着极其重要的作用。proSP-B氨基酸序列的疏水性和其结构的独特性,研究学者将其归为SAPLIPs 家族的一员,SAPLIPs 家族成员作为一类具有独特结构的蛋白族群,具有非常广谱的生物学功能,而抗菌活性是其最为重要的功能之一。
而近几年来,抗生素在医药卫生及食品上的广泛应用及不合理使用,引起了耐药、泛耐药,交叉耐药,甚至是超级细菌的不断出现,使得抗感染问题变的越来越严峻,也使得人类的健康及生命安全面临极大威胁。因此,开发研究新的高效,低毒,具有新的抗菌作用机制的药物迫在眉睫。随着抗生素毒副作用和细菌耐药性的增加,抗菌肽作为一类由生物体自身生理活动产生的,具有广谱抗菌活性的小分子物质,日渐成为替代传统抗生素的一类新型抗菌药物。
在本研究中,我们利用基因工程技术构建表达载体,并用IPTG成功诱导表达出proSP-B蛋白,并用GSTrap FF 16/10成功纯化出蛋白。接着我们以CCL-149细胞为实验对象,分析proSP-B蛋白在细胞中的定位,及proSP-B蛋白的毒性作用,为proSP-B蛋白的抗菌作用及作用机理奠定基础;接下来用滤纸片法选择金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌、红色毛癣菌、石膏样小孢子菌、耐药金葡菌、铜绿假单胞菌作为研究对象,考察proSP-B蛋白的抗菌活性,接着以金黄色葡萄球菌为重点研究对象,考察蛋白的抗菌作用机理,为开发新型的抗生素替代基因工程药物奠定基础。
已经申请国家发明专利:肺表面活性蛋白B前肽的重组蛋白及其制备方法和应用,201710340260.7 。