本发明提供了一种温度响应型智能细胞培养容器的制作方法,步骤如下(1)将聚(N‑异丙基丙烯酰胺)纳米凝胶颗粒均匀分散在温度为4~25℃、pH值为7~10的灭菌Tris缓冲液中得到纳米凝胶颗粒分散液,将盐酸多巴胺溶解于纳米凝胶颗粒分散液中得到修饰液;(2)将修饰液加入细胞培养容器中使修饰液浸没细胞培养容器的待修饰部位,在有氧条件下于20~40℃反应至少3h,然后用去离子水清洗经过前述处理的细胞培养容器,再将清洗后的细胞培养容器在20~50℃干燥去除细胞培养容器表面的水分,即完成温度响应型智能细胞培养容器的制作。该方法的工艺简单、生产成本低廉,并且制作的温度响应型细胞培养容器的使用稳定性好。