本发明公开一种细胞黏附力的检测方法,包括以下步骤:a、制备多细菌探针和/或单细菌细胞探针样本;b、采用接触模式对多细菌探针和/或单细菌细胞探针样本进行AFM测量,获取随时间变化的力-距曲线;c、根据细菌细胞荧光染色、电镜图片及力-距曲线形态判断细菌探针质量,去除无效曲线后读取粘附峰的最大值,即为样本表面与细胞的粘附力。本发明还公开了一种细胞探针固定装置。本发明采用原子力显微镜在近生理条件下定量检测多细菌及单细菌的黏附力,分析细菌黏附行为,可用于材料的抗菌性评价,为菌斑生物膜的形成机制研究提供新的方法和思路;本发明同时公开了一种适用于本检测方法的细胞探针固定支架。