本发明提供了一种低温稀酸与瞬间汽爆联用预处理生物质制备糖化液的方法,该方法包括步骤:将颗粒度150mm以下的生物质物料与1%~5%的稀硫酸溶液混匀,25℃~95℃反应10~14小时,过滤掉上清液,用水冲洗掉固体物料上的残留稀酸;对稀硫酸处理后的物料进行汽爆预处理,汽爆压强2MPa~2.8Mpa,维压时间80s~120s;在40~55℃下干燥经瞬间弹射蒸汽爆破预处理后的物料,然后与pH=4.8±0.1的醋酸-醋酸钠缓冲液混匀,物料与缓冲溶液的质量比为1:10~1:100,加入纤维素酶,混匀,45~55℃以80~120rpm转速震荡反应48h~72h,之后经沉降,获取上清液即为糖化液。利用本发明的方法,可高效获取糖化液。