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摘要:本发明公开了一种利用单层磷脂膜组装形成α-溶血素七聚体生物纳米孔的方法,本发明将重组有野生型αHL基因的pT7质粒转入到BL21(DE3)pLys中,进行IPTG诱导后,用超滤离心管分子截留法纯化单体蛋白,并在DPhPC单层膜上实现αHL单体蛋白的组装,通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳证明了蛋白表达,纯化及组装结果。αHL七聚体生物纳米孔单通道电流记录特征良好。当制备的七聚体纳米孔用于单分子分析时,能够实现无机离子,小分子,DNA,RNA等检测。本发明制备纯化蛋白方法简单、经济、快速,并且可以适用于αHL的各种突变型蛋白,同源以及异源七聚体纳米孔制备。