本发明提供一种负载维生素C的丝素蛋白/透明质酸复合纳米纤维的制备方法,其具体操作步骤如下:将丝素蛋白溶于去离子水中,室温下充分搅拌至完全溶解,得到质量百分比为30-35%的丝素蛋白溶液;将透明质酸溶于去离子水中,室温下充分搅拌至完全溶解,得到质量百分比为2-4%的透明质酸溶液;将丝素蛋白溶液和透明质酸溶液混合,得到丝素蛋白/透明质酸混合溶液;将维生素C磷酸酯钠溶于丝素蛋白/透明质酸混合溶液中,充分搅拌均匀得到共混静电纺丝液;将共混静电纺丝液通过静电纺丝,得到负载维生素C的丝素蛋白/透明质酸复合纳米纤维。该方法制备出的纳米纤维能在组成上模拟细胞外基质的成分,赋予纳米纤维优异的生理功能。