本发明属于法医学技术领域,具体涉及基于74个Y染色体SNP遗传标记的法医学二代测序试剂盒。本发明要解决的技术问题是使用二代测序技术,利用Y染色体SNP遗传标记对中国群体来源的检材在Y染色体进化树上的位置进行划分。本发明的技术方案是基于74个Y染色体SNP遗传标记的法医学二代测序试剂盒,包含了用于复合扩增的72对引物的混合物,使同时检测74个SNP成为现实。本发明试剂盒应用了单管内复合扩增和二代测序技术,可一次性获得多个生物检材的74个Y染色体SNP遗传标记的基因分型,并将中国群体来源的男性样本正确归属至现已公认的Y染色体进化树分枝上。