[00070506]一种利用CRISPR‑Cas9清除鲍曼不动杆菌耐药性基因的方法
技术详细介绍
本发明公开一种利用CRISPR‑Cas9清除鲍曼不动杆菌耐药性基因的方法，该方法是先从临床收集鲍曼不动杆菌，采用药敏纸片法对鲍曼不动杆菌进行耐药测定处理后，进行耐药分析及统计；将多重耐药的鲍曼不动杆菌，用裂解煮沸法将其进行DNA的提取，然后利用其设计好的耐药基因引物进行扩增分析；根据上一步耐药基因的检测，挑选出含有OXA‑23基因的鲍曼不动杆菌，构建CRISPR/Cas9和sgRNA的质粒，将其导入到含有OXA‑23基因的鲍曼不动杆菌中，构建OXA‑23基因缺失鲍曼不动杆菌突变菌株，对其进行耐药性分析。该方法操作简单、敲除效率高，为阻止耐药基因的传播和治疗耐药细菌提供新的方法和思路。
