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摘要:一种基于单克隆抗体的检测食品中李斯特菌属的双抗体夹心ELISA法,属于免疫分析技术领域。本发明用原核表达的单增李斯特菌P60蛋白免疫8周龄BALB/c小鼠,经免疫、融合、多重筛选得到15株李斯特菌属特异性单克隆抗体,分别标记辣根过氧化物酶HRP,并以单增李斯特菌CMCC54003为目标物进行两两配对。经筛选不同配对的交叉反应,以2G7为包被抗体、2H8‑HRP为酶标抗体建立夹心ELISA方法对包括单增李斯特菌在内的李斯特菌属均有交叉反应。对测试的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、大肠杆菌O157、沙门氏菌、阪崎肠杆菌、空肠弯曲杆菌、结肠弯曲杆菌没有交叉反应。本发明制备了李斯特菌属特异性的单克隆抗体并建立了双抗体夹心ELISA法,为食品中李斯特菌属的特异性快速检测提供了技术手段。