摘要:本发明适用于光学显微成像领域,提供了一种二次谐波高分辨率成像方法,包括以下步骤产生激发光;对所述激发光进行调制,形成条纹激发光斑;移动所述条纹激发光斑,并且在每移动一次之后,将所述条纹激发光斑在样品上进行时间空间聚焦,以在样品上激发出二次谐波;逐次探测激发出的所述二次谐波;根据探测到的所有二次谐波进行频谱分析,获得图像。本发明还提供了一种二次谐波高分辨率成像方法及成像系统,包括激发光源、空间光调制器、移动控制单元、光栅、物镜及探测器。本发明提供的二次谐波高分辨率成像方法及系统,可以获得高空间分辨率的二次谐波显微成像,扩大了二次谐波显微成像应用范围。