[00072910]菲律宾蛤仔抗菌蛋白的制备方法
技术详细介绍
本发明公开一种菲律宾蛤仔抗菌蛋白的制备方法，以如SEQ ID NO：1 所示cDNA为模板、以具有EcoR I 和NotⅠ两个酶切位点的PCR反应引物进行PCR反应；上游引物EcoR I：5'‑ GAATTCATGGCTTGGCTGACAGCATCTG ‑3' 下游引物NotⅠ：5'‑ GCGGCCGCTTATTTGTCTTTAACAGCTCTC ATTCTGC ‑3'；将PCR反应产物与克隆载体相接，并转化到感受态细胞；提取所得克隆和表达载体质粒，分别用EcoR I和Not I双酶切，胶回收目的片段后用连接酶连接，再转化到感受态细胞；提取阳性克隆并将所得阳性克隆进行IPTG诱导表达；对表达的重组蛋白进行提取并纯化。
