本发明提供了一种草莓专用抗枯萎病生物有机肥的制备方法,以猪粪及玉米秸秆为堆料,接种由枯草芽孢杆菌ABTNL‑2号、苏云金芽孢杆菌ABTNL‑4号、巨大芽孢杆菌及胶质芽孢杆菌组成的复合微生物发酵菌剂和地衣芽孢杆菌ABTNL‑1号生防菌剂,发酵,制得具有抗草莓枯萎病功能的生物有机肥。本发明菌种之间协同作用,大大延长高温持续时间,缩短了堆肥腐熟周期;可以有效的对草莓枯萎病进行生物防治;本发明利用猪粪和玉米秸秆,并结合复合微生物发酵菌剂和生防菌剂,采用一步贯通法成功制备草莓专用抗枯萎病生物有机肥,实现了猪粪和玉米秸秆的无害化处理和资源化利用、降低了农药和化肥的使用,大大降低了生物有机肥的生产成本。